研究課題
基盤研究(B)
本研究では、受精前後における遺伝子発現リプログラミング機構の解明のため、次のような研究ステップを計画した。1.リアルタイムに発現している遺伝子プロファイルの作成2.転写制御機構の解析-転写因子・エピジェネティックな修飾3.RNAiによる機能解析以下にこの計画に沿った研究成果の概略を記す。1.1細胞期胚にBrUTPを導入し、一定時間内にこれを取り込んだmRNAを抗BrU抗体で単離した後、これをマイクロアレイによって解析することで、1細胞期胚における遺伝子発現プロファイルを明らかにすることを試みた。その結果、1細胞期で発現している50以上の遺伝子を明らかにした。これらの遺伝子の制御領域を解析した結果、PaxおよびEts familyに属する転写因子が結合する配列を持つものが多数存在することが明らかとなった。2.まず、1500の転写因子を載せたマイクロアレイを用いて、成長卵および初期胚での転写因子の発現を調べた。その結果、転写因子の発現パターンは1細胞期から2細胞期にかけて最も大きく変化していた。さらに成長卵から2細胞期胚にかけてTATA-lessのプロモーターを活性化するEts familyに属する転写因子群の発現増加が顕著に見られた。次に、成長期卵と受精後の初期発生期胚について、様々なエピジェネテック調節に関わるヒストン修飾を調べた。その結果、卵が成長する過程において、調べたすべてのヒストン修飾が増加していた。また、受精後においては、着床期前初期発生過程で様々な修飾が大きく変化していることが明らかとなった。3.成長中の卵にRNAiを顕微注入し、in vitroでGV期卵にまで成長させ、その後め減数分裂、および初期発生への影響を調べるための実験系の確立を試み、本実験系が効果的に機能することを確認した。
すべて 2008 2007 2006 2005
すべて 雑誌論文 (28件) (うち査読あり 14件) 学会発表 (11件) 図書 (1件)
Biology of Reproduction 78
ページ: 413-424
Biol. Reprod. 78
Journal of Reproduction and Development 53
ページ: 1043-1052
Biochem. Biophys. Res. Comm. 358
ページ: 578-584
Reproduction 133
ページ: 85-94
Zygote 15
ページ: 117-128
J. Reprod. Dev. 53
Biology of Reproduction 75
ページ: 508-517
Proc. Natl. Acad. Sci., USA 103
ページ: 7339-7344
Biochem. Biophy. Res. Comm. 344
ページ: 675-679
Journal of Cell Science 119
ページ: 1985-1991
Journal of Reproduction and Development 52
ページ: 99-106
Molecular Reproduction and Development 72
ページ: 281-290
Biol. Reprod. 75
J. Cell Sci. 119
J. Reprod. Dev. 52
Cell Research 15
ページ: 127-132
Molecular Reproduction and Development 71
ページ: 123-128
Developmental Biology 286
ページ: 102-113
Mol. Reprod. Dev. 72
Cell Res. 15
Mol. Reprod. Dev. 71
Dev. Biol. 286
