| 研究課題/領域番号 |
17390044
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
医療系薬学
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
財津 潔 九州大学, 大学院薬学研究院, 教授 (70091329)
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| 研究分担者 |
浜瀬 健司 九州大学, 大学院薬学研究院, 助教授 (10284522)
樋口 駿 九州大学, 大学院薬学研究院, 教授 (40218699)
大戸 茂弘 九州大学, 大学院薬学研究院, 教授 (00223884)
上園 慶子 九州大学, 健康科学センター, 教授 (00168618)
福岡 秀興 東京大学, 大学院医学研究科, 助教授 (80111540)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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| キーワード | メラトニン / D-アラニン / 睡眠 / サーカディアンリズム / 蛍光検出 / HPLC / 睡眠障害 / 臨床マーカー |
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| 研究概要 |
メラトニンはほ乳類における概日リズムの信頼できる表現型とされ、その生理機能解明や体内動態解析は重要である。本研究では睡眠障害の究明にメラトニンと概日リズムが認められたD-アラニンを指標として睡眠実質を評価する方法の確立が目的である。
(1)平成17年度:閉塞性睡眠時無呼吸低呼吸症候群(OSAHS)患者4名、健常者7名につき血中メラトニンリズムを測定した。OSAHS患者ではメラトニン濃度が40pg/mL血漿以下であり、軽度の夜間上昇があった。また、血漿中には、測定妨害成分により測定できない例がありこれを改良した。尿についても來雑物による妨害を受けない方法としたが、再現性に問題が残った。
(2)平成18年度:従来、逆相カラムHPLCによりメラトニン画分を粗分離した後、強蛍光性のN-[(6-Methoxy-4-oxo-1,4-dihydroquinolin-3-yl)methyl]acetamideに変換し3-カラムHPLCでリズム解析を行ってきた。しかし再現性に問題があった。そこで、メラトニンの粗分離を正確に行うための参照化合物としN-acetyltryptamin(NAT)、酸化反応のモニター用として内標準N-propionyl-5-methoxytryptamin(PMT)を使用する精密分析システムを開発した。
(3)D-アラニン測定には、OPA-蛍光ラベル化後、逆相HPLCで定量するが所用時間短縮のため減少勾配溶出HPLCとも言える独自のHPLC溶出法を開発した。D-アラニンはメラトニンと異なり、睡眠のリズムがシフトすると、血中D-アラニンが最大濃度を示す時間も変わり、睡眠に入る前に濃度は高く、目覚めの時点では最も低い濃度となることを確認した。
以上のように、メラトニンとD-アラニンの血中濃度変化を測定することにより睡眠の状況をある程度推定できると思われ、今後、睡眠障害患者と健常者の例数を増やし、検証することが必要である。
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