VEGF受容体の妊娠中毒症への関与の解析と治療への応用

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17390110
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 渋谷 正史 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10107427)
• キーワード: VEGF受容体-1 / 妊娠 / 胎盤 / trophoblast stem cells / RNAi

研究概要

本年度は、胎盤由来の幹細胞(trophoblast stem cells、TS細胞)の分化誘導を行うと、VEGF受容体-1(VEGFR-1)およびその可溶化型であるsVEGFR-1の発現が誘導される事を見いだした。そこで次にVEGFR-1の発現制御領域の探索を行なう目的で、マウスVEGFR-1遺伝子の5'上流側のゲノム領域約8kbを単離した。現在この領域について、ルシフェラーゼを用いたレポーター解析を行い、TS細胞におけるVEGFR-1/sVEGFR-1の発現制御領域の同定を試みている。
また、in vivo、特に妊娠、および個体発生におけるsVEGFR-1の機能を明らかにするために、sVEGFR-1の配列に特異的なsiRNAを発現するトランスジェニックマウスの作成を試みた。まず上述したTS細胞の分化誘導系を用いて、VEGFR-1の発現には影響を与えず、sVEGFR-1の発現のみを効果的に抑制するsiRNA配列を決定した。次にこのsiRNAをU6プロモーターの下流につないだトランスジーンを有するトランスジェニックマウスを作成した。生まれて来たトランスジェニックマウスにおけるsiRNAの発現は、トランスジェニックマウスの脳、腎臓、肺、胸腺からRNAを抽出し、ノーザンブロッティングを行う事によって確認した。現在は、妊娠させたトランスジェニックマウスの胎児、胎盤の組織学的解析を行い、妊娠、胎盤、そして個体発生におけるsVEGFR-1の機能を明らかにする事を試みている。
上記の実験に加えて、妊娠中に発現が上昇する事が知られているsVEGFR-1の発現誘導因子(群)の探索についても、妊娠マウス胎盤を試料として行っている。

研究成果

• [雑誌論文] VEGF-A is involved in guidance of VEGF-receptor-positive cells to the anterior portion of early embryos. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hiratsuka, S., Kataoka, Y., Nakao, K., Nakamura, K., Morikawa, S., Tanaka, S., Katsuki, M., Maru, Y., Shibuya, M.
  • 雑誌名: Mol.Cell.Biol. 25 ページ: 335-363
• [雑誌論文] Rationale for antiangiogenic cancer therapy with vaccination using epitope peptides derived from human vascular endothelial growth factor receptor 2. (2005)
  • 著者名/発表者名: Wada, S., Tsunoda, T., Baba, T., Primus, J., Kuwano, H., Shibuya, M., Tahara, H.
  • 雑誌名: Cancer Res. 65 ページ: 4939-4946
• [雑誌論文] Vascular endothelial growth factor receptor-1 signaling is essential for osteoclast development and bone-marrow formation in CSF-1-deficient mice. (2005)
  • 著者名/発表者名: Niida, S., Kondo, T., Hiratsuka, S., Hayashi, S.-I., Amizuka, N., Noda, T., Ikeda, K., Shibuya, M.
  • 雑誌名: Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. 102 ページ: 14016-14021
• [雑誌論文] Locating inositol 1,4,5-trisphosphate in the nucleus and neuronal dendrites with genetically encoded fluorescent indicators. (2005)
  • 著者名/発表者名: Sato, M., Ueda, Y., Shibuya, M., Umezawa, Y.
  • 雑誌名: Anal Chem. 77 ページ: 4751-4758
• [雑誌論文] The vascular endothelial growth factor (VEGF)/VEGF receptor system and its role under physiological and pathological conditions. (2005)
  • 著者名/発表者名: Takahashi H, Shibuya M.
  • 雑誌名: Clin Sci(Lond). 109 ページ: 227-241