| 研究課題/領域番号 |
17390127
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
小熊 惠二 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (00002262)
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| 研究分担者 |
横田 憲治 岡山大学, 医学部, 助教授 (00243460)
綾田 潔 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助手 (00379835)
武士 甲一 帯広畜産大学, 畜産学部, 教授 (50396339)
有満 秀幸 藤田保健衛生大学, 医学部, 講師 (40367701)
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| キーワード | 細菌 / 感染症 / 蛋白質 / 医療・福祉 / 食品 |
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| 研究概要 |
1.ワクチンおよび毒素検出用イムノストリップ法の開発など
C型、D型において、神経毒素のbinding domainである重鎖のC末端側5万の部分(Hc)は、大腸菌においてGST融合リコンビナントタンパク質として大量に産生でき、マウスで充分なワクチン効果を示すことを認めた。同様にA、 B、 E、 F型でもHc部分の作製を試みたところ、いずれもC、DのHcのようには大量には産生できなかった。今後は、C、 D型の場合は商品化を、他の型の場合は異なる方法による大量生産を試みる予定である。イムノクロマト法の開発をB-F型毒素に反応するモノクローナル抗体を用いて行ったが、上手くいかなかったので、A、 B、 E、 F型の神経毒素に対するポリクローナル抗体を用いて行ったところ、各毒素100pg-1ngを検出できる系が確立できた。C、 D型の場合は、上記Hcに対するポリクローナル抗体を作製し、同様のイムノクロマト法を開発する予定である。また、C型HA1の3次構造、および、ガラクトースとの結合に必要なアミノ酸残基を同定すると共に、その立体的な結合様式を解明した。
2.治療用神経毒素の開発
A型、B型神経毒素をラクトースゲルカラムを用いて簡単に精製し、長期間保存する方法を開発し、製品の安全性も確かめた後、他の方法では治らない切迫性尿失禁の患者計18名に試みたところ、16名で著効を示し、全例において、大きな副作用は認められなかった。なお、毒素投与時には、毒素接種の状態を確認するため、ヒトに使用可能な色素である「インジゴカルミン」を添加すると良いことが判明した。また、三叉神経痛の治療も開始するため、現在、ラットを用いてその基礎実験を開始した。
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