| 研究課題/領域番号 |
17390395
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| 研究機関 | 新潟大学 |
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研究代表者 |
薄井 宏 新潟大学, 脳研究所, 助手 (20192510)
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| 研究分担者 |
崎村 建司 新潟大学, 脳研究所, 教授 (40162325)
鷲山 和雄 新潟大学, 脳研究所, 助教授 (00183715)
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| キーワード | 脳腫瘍モデル動物 / コンディショナルノックアウト / 癌抑制遺伝子 / グリオーマ / 髄芽細胞腫 |
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| 研究概要 |
コンディショナルノックアウト法(細胞選択的な標的遺伝子破壊法)を用いて癌抑制遺伝子を脳内細胞選択的に破壊し、脳腫瘍モデルマウスを作製することが本研究の目的である。平成18年度には、以下の研究成果を得た。
(1)脳内細胞選択的に選択的に発現するNestin、βIII tubulin遺伝子に組み換え酵素Creをノックインしたマウスを作製し、レポーターマウスと交配してCreが働く細胞の分布を解析した。その結果、Nestin-Creマウスでは神経系に選択的なCre活性が確認できた。一方、βIII tubulin-Creマウスでは全身の臓器にCre活性を認めたために、βIII-tubulin-CreマウスをFLPマウスと交配し、外来性のNeomycin耐性遺伝子を取り除いたマウスを作製した。その結果得られたβIII tubulin-Cre(ΔNeo)マウスでは、内在性βIII tubulin遺伝子と同様な神経細胞に選択的なCre活性を確認することができた。
(2)昨年度に作製したPtc-floxマウス、Nf1-floxマウスを全身でCreを発現するTLCN-Creマウスと交配し、フレームシフトエクソンを欠失したPtc(+/-)、Nf1(+/-)マウスを作製した。これらのマウス同士を交配して得られたPtc(-/-)、Nf1(-/-)マウスが胎生致死であることを確認した。また、コンディショナルノックアウト用に、floxマウスをFLPマウスと交配してPtc-flox(ΔNeo)、Nf1-flox(ΔNeo)マウスを作製した。
以上のように、脳内細胞選択的なCre発現マウス及び癌抑制遺伝子PtcとNf1のfloxマウスが共に機能することが確認できた。現在、これらのマウスを交配することで、脳内細胞選択的にPtcあるいはNf1が破壊されるマウスを作製しつつある。
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