| 研究課題/領域番号 |
17390418
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| 研究機関 | 大分大学 |
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研究代表者 |
吉岡 秀克 大分大学, 医学部, 教授 (00222430)
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| 研究分担者 |
松尾 哲孝 大分大学, 医学部, 助手 (10284788)
住吉 秀明 大分大学, 医学部, 助手 (60343357)
調 恒明 大分大学, 医学部, 助教授 (50179058)
二宮 善文 岡山大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (70126241)
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| キーワード | コラーゲン / 遺伝子発現 / 転写調節機構 / 細胞外マトリックス |
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| 研究概要 |
間葉系幹細胞は種々の刺激の影響を受けて、骨芽細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、筋芽細胞、線維芽細胞に分化する。これらの細胞は分化と共に細胞外マトリックスであるコラーゲンを産生するようになる。その中で私達のグループは組織に比較的微量存在するIII型、V/XI型コラーゲンの遺伝子発現及び機能について研究を行っている。平成18年度は主に以下の2点について結果を得た。
1)V型コラーゲンα3鎖遺伝子の転写調節
前年度、組織発現及び機能について検討したマウスV型α3鎖遺伝子について、その転写調節機構について検討を行った。まず、マウス胎児mRNAを用いて、オリゴキャップ法により転写開始点を決定した。主な転写開始点は翻訳開始点約100bp上流に存在した。次に、この転写開始点上流約1.8kbの遺伝子断片をクローニングし、この遺伝子の基本プロモーター活性を検討した。その結果、転写開始点約300bpの領域にルシフェラーゼ活性が認められ、この領域に基本転写機構が存在する事が明らかとなった。
2)III型コラーゲンα1鎖遺伝子の転写調節
転写調節機構の解明が進んでいないIII型コラーゲンα1鎖遺伝子について、従来のプラスミドによるプロモーターアッセイ法でなく、stable transfectionによるトランスジーンを用いて解析した。近位上流領域のみでなく、染色体上の広範囲にわたる遺伝子の配置も関与する未知の転写抑制機構があることがわかった。また細胞の形質転換の過程で、この転写抑制機構が働いている細胞と働いていない細胞が分離できた。
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