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2006 年度 実績報告書

ES細胞から神経幹細胞への分化誘導機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 17500214
研究機関横浜市立大学

研究代表者

中山 孝  横浜市立大学, 医学部, 準教授 (90150060)

研究分担者 井上 順雄  首都大学東京, 人間科学研究科, 教授 (50159985)
キーワードES細胞 / アストロサイト / Neural Stem Sphere / 神経幹細胞 / 神経細胞
研究概要

我々は胚性幹(ES)細胞のコロニーをアストロサイトの培養上清(ACM)で浮遊培養し、Neural Stem Sphere(NSS)と名付けた細胞凝集体を形成させることで、ES細胞から直接に効率よく神経幹細胞を作製することができた。さらにこの神経幹細胞がACM中で神経細胞のみに一方向的に分化誘導できることを既に報告した(Neuroreport15:487-491、2004)。NSS法によるES細胞由来の神経幹細胞が、他の神経系細胞に分化するかどうかを検討したところ、神経幹細胞からアストロサイトに分化することを見いだした。神経幹細胞を単層培養で増殖させる時には、培養液中に繊維芽細胞増殖因子(FGF)-2の添加が必要であるが、培地をFGF-2不含有の培養液に交換するだけでアストロサイトに分化誘導することができた。培地交換後5日目には、90%以上の細胞がアストロサイトのマーカータンパク質であるGFAPに対する抗体に陽性となっており、神経幹細胞から神経細胞への分化とほぼ同じ時間経過で分化が誘導された。また、神経幹細胞のマーカー遺伝子のNestin発現は消失し、神経細胞のマーカー遺伝子のMAP2の発現は認められなかった。これらの結果から、FGF-2除去により、全ての神経幹細胞が一方向的にアストロサイトへ分化したことが明らかとなった。ES細胞由来の神経幹細胞はFGF-2が存在する時には強制的に分化が抑制されて細胞増殖し、またACM中の分化誘導因子存在下では一方向的に神経細胞に分化する。しかしながら、アストロサイトへの分化誘導にはまったく液性因子を必要としない。これらの事から、ES細胞由来の神経幹細胞のデフォルトでの分化の終着点は、アストロサイトであることが結論づけられた。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2006

すべて 雑誌論文 (4件) 図書 (1件)

  • [雑誌論文] Astrocytogenesis of ES-Cell-derived Neural Stem Cells : Default Differentiation.2006

    • 著者名/発表者名
      Nakayama T
    • 雑誌名

      Neuroreport 17

      ページ: 1519-1523

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Gene expression during differentiation from primate embryonic stem cells into neural cells by Neural Stem Sphere method.2006

    • 著者名/発表者名
      Sai T
    • 雑誌名

      Neurosci Res 55

      ページ: S145

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [雑誌論文] Effects of astrocyte-derived factor and cell-cell communication on uni-directional differentination from mouse embryonic stem cells into neural cells.2006

    • 著者名/発表者名
      Otsu M
    • 雑誌名

      Neurosci Res 55

      ページ: S241

  • [雑誌論文] Proteomic characterization of neural stem cells during in vitro differetiation of mouse ES cells into neurons.2006

    • 著者名/発表者名
      Tatsuno R
    • 雑誌名

      Neurosci Res 55

      ページ: S243

  • [図書] Embryonic Stem Cell Protocols, Vo1 II : Differentiation Models2006

    • 著者名/発表者名
      Nakayama T
    • 総ページ数
      13
    • 出版者
      Humana Press, Totowa, New Jersey

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公開日: 2008-05-08   更新日: 2016-04-21  

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