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2008 年度 実績報告書

蛍光相関分光法を用いたミトコンドリアDNA異常検出システムの開発

研究課題

研究課題/領域番号 17500299
研究機関山形大学

研究代表者

野村 保友  山形大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (80237883)

キーワードミトコンドリアDNA / 蛍光相関分光法 / ブラウン運動 / 拡散定数 / 共焦点光学系 / レーザー
研究概要

まず素処理した細胞からミトコンドリアDNAを精製して、そのPCR産物の拡散係数から酸化的ストレスによる損傷の程度を推定できることを指摘した(Nomura et.al., Anal Biochem 2006)。さらにミトコンドリア遺伝子変異のホットスポットに注目して、制限酵素処理による断片長分布を蛍光相関分光の多成分解析によって簡便に推定できるようにした(Nomura et al., Exp Mol Pathol 2006)。またミトコンドリアそのものを緑色蛍光タンパクでラベルして観察すると、酸化的ストレスはミトコンドリアDNAだけでなく、ミトコンドリアの形態に影響を与えているように見えた。しかしミトコンドリアは大変複雑な形態であり、その変化を客観的に評価することは困難であった。そこで画像処理によるミトコンドリアの形態の定量解析法を提案した。さらにミトコンドリア病の新たな診断法を確立するために、ミトコンドリア自身の複雑な形態変化とミトコンドリアDNAのダイナミックな移動を蛍光波長の異なる色素でラベルして同時に観察し、画像相関分光解析を行っている。

  • 研究成果

    (5件)

すべて 2009 2008

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (1件) 図書 (2件)

  • [雑誌論文] Mitochondria-targeted green fluorescent protein for quantitative monitoring of mitochondrial morphology in living cells2009

    • 著者名/発表者名
      Nomura Y Takayama T, Sato M, Takahash E, Feng Z, Nakamura T
    • 雑誌名

      Lett. Drug Design Discov 6(4)(in press)

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Comparison of mRNA expression of transcriptional factors and intercalated disk constituent proteins between in vivo and cultured cardiomyocytes2008

    • 著者名/発表者名
      Nakamura T, Feng Z, Honda T, Nomura Y, Kitaiima T. Umezu M
    • 雑誌名

      J Artif Organs 11

      ページ: 134-140

    • 査読あり
  • [学会発表] Matrix-targeted green fluorescent protein for quantitative monitoring of mitochondrial morphology in living cells2008

    • 著者名/発表者名
      Nomura Y, Takayama T, Sato M, Takahashi E, Feng Z, Nakamura T
    • 学会等名
      Experimental Biology 2008
    • 発表場所
      San Diego
    • 年月日
      2008-04-05
  • [図書] 「ミトコンドリアレベルの酸素代謝測定」、からだと酸素の事典2009

    • 著者名/発表者名
      野村保友、馮忠剛、中村孝夫
    • 出版者
      朝倉書店(印刷中)
  • [図書] "Cobalt treatment suppressing mitochondrial DNA damage caused by acute exposure of H2O2" in DNA Damage Research2009

    • 著者名/発表者名
      Nomura Y, Feng Z,Nakamura T.
    • 総ページ数
      1-8
    • 出版者
      Nova Science Pub

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公開日: 2010-06-11   更新日: 2016-04-21  

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