| 研究課題/領域番号 |
17500303
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| 研究機関 | 信州大学 |
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研究代表者 |
水野 理介 信州大学, 医学部, 講師 (30273080)
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| 研究分担者 |
伊古美 文隆 信州大学, 医学部, 助教授 (50262704)
河合 佳子 信州大学, 医学部, 助手 (10362112)
杉原 伸宏 信州大学, 大学院医学研究科, 助手 (10324245)
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| キーワード | リンパ管 / 内皮細胞 / 透過性 / 培養 / リンパ節 |
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| 研究概要 |
1.培養リンパ管内皮細胞の選択的物質透過性を制御する因子の解析(担当:水野・伊古美・河合)
●ラット・マウスのリンパ管から採取したリンパ管内皮細胞を用いてリンパ管内皮細胞の物質透過性を制御する因子である細胞内骨格タンパク質であるF-アクチンの発現、細胞間接着因子であるカドヘリンの発現、細胞膜の水チャネルであるアクアポリンの発現を免疫組織化学的に検討した。
●リンパ管内皮細胞におけるF-アクチン、カドヘリン、アクアポリンの発現制御様式の細胞内情報伝達システムの解析を生化学的に解析した。
●リンパ管内皮細胞における細胞接着分子の発現を検討し、リンパ管内皮細胞E-セレクチンとリンパ球シアリルルイスA/Xとの関係を検討した。
2.培養リンパ管平滑筋細胞株の確立(担当:水野・河合)
●リンパ管の収縮機能ならびにリンパ管内皮細胞機能に影響を与えるリンパ管平滑筋細胞株の樹立を行い、平滑筋に特有な細胞質タンパク質であるSM1、SM2、α-アクチンの発現を免疫組織化学的ならびに生化学的に検討した。
●培養リンパ管平滑筋の収縮機能特性を、生体ビデオ蛍光顕微鏡システムを用いて検討した。
●リンパ管平滑筋の収縮特性に対する細胞外グルコース濃度の関与を検討した。
●リンパ管平滑筋の収縮特性に対するReactive Oxygen Speciesの関与を検討した
3.in vitroリンパ管透過性解析(担当:水野・伊古美・杉原)
ラットから摘出した微小リンパ管(内径〜200μm)の灌流標本を作製し、その標本内腔に選択的にトレーサーを投与し、トレーサーのリンパ管壁透過性を定量的に評価する。
●リンパ管内腔に種々の分子量のトレーサー(FITC-デキストラン)を投与し、リンパ管壁透過性における物質の分子量依存性反応を定量的に評価した。
●リンパ管内皮細胞をトリプシンによって剥離したリンパ管の高分子デキストランの透過性を検討した。
●リンパ管壁透過性機能に与える炎症性のサイトカインであるTNFα、IL1βの影響(リンパ管壁透過性亢進作用)をトレーサーを用いて検討した。
●リンパ管壁透過性機能におけるRho-kinaseの影響(リンパ管壁透過性亢進作用)を検討した。
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