研究課題
#1近年我々は、PCBが甲状腺ホルモン(TH,T3)受容体(TR)を介する転写系に作用し、低濃度(10^<-10>M)でT3により活性化された転写を抑制し、その機序は標的遺伝子プロモーター領域からTRが部分的に解離するためであることを明らかにした。従来、in vitroでのTRとDNAの結合はGel Shift法により証明されてきたが、放射性同位元素(RI)を使用する上、時間が48時間程度かかり、多検体のスクリーニング法として適さない。そこで非RI物質でDNAを標識した新たなスクリーニング法を考案した(Liquid nuorescent DNA pull down assay ; LFDPD特許出願2006-064876)。この方法により結果が3-4時間で得られ、RIを使わずに、排出物を90%以上削減することができた。#2 PCBのTRへの作用部位を解明するために、TR及び、glucocorticoid受容体(GR)のN末端、DNA結合領域(DBD)、LBDを組み合わせて作成したキメラ受容体を用いて、レポーターアッセイを行った。TRのDBDからLBDにかけての比較的広い領域にPCBが作用することが示唆された。Gel Shift法及び、LFDPDを用いても一致する結果を得た。#3 PCBより毒性が強いとされるダイオキシンについてTRの転写系に対する影響を調べたが、ほとんど認められなかった。#4 酵母膜蛋白を用いた新たな同定法であるSos-Ras Yeast Two-hybrid法を用いて胎児脳cDNAライブラリーより新たな核内蛋白を同定した。この蛋白は、ノーザンブロット法により広範囲に発現しており、転写コリプレッサーとして機能することが明らかとなった。#5 本申請で購入した倒立型顕微鏡の設定及び、予備実験が完了した。
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Endocrinology 148
ページ: 1745-1753
Endocrine (in press)
Neurotoxicology 27
ページ: 176-183
J Neuroimmunol 172
ページ: 59-65
J Endocrinol 190
ページ: 897-902
Adv Exp Biol Med Biol 580
ページ: 260-274
ホルモンと臨床 54
ページ: 703-710
神経研究の進歩 50
ページ: 833-841
Endocrine J 53
ページ: 267-274
Endocrinology 147
ページ: 1452-1457
ページ: 215-220
Life Sci 78
ページ: 1760-1766
