脂質酸化における血液内PAF-アセチルヒドロラーゼの防御的役割の解明

2006 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 17590069
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 帝京大学
• 研究代表者: 唐沢 健 帝京大学, 薬学部, 教授 (50186029)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• キーワード: PAF / PAF-アセチルヒドロラーゼ / 質量分析法 / 酸化脂質 / LDL / 赤血球

研究概要

血漿型PAF-アセチルヒドロラーゼの遺伝的欠損(V279F変異)を持つヒト血漿より密度勾配遠心法によりLDL画分を調製し、Cu^<2+>による酸化修飾を与えた後、ESI-MS/MS法により脂質の分析を行った。その結果、リノール酸の1酸素体および2酸素体を結合するホスファチジルコリン分子種が対照と比べ顕著に増加していた。これら脂質分子種はヒドロキシリノール酸およびヒドロペルオキシリノール酸を有するホスファチジルコリンと推定され、血漿型PAF-アセチルヒドロラーゼはこれらの酸化リン脂質の分解除去に役割を果たすことが示唆された。一方、ヒト赤血球膜脂質をCu^<2+>で処理した後に、赤血球に存在する主要なPAF-アセチルヒドロラーゼサブタイプであるI型PAF-アセチルヒドロラーゼを作用させた場合の酸化脂質分子種について、ESI/MS/MS法により分析した結果からは、この酵素は、これらの酸化脂質分子種を基質とし分解せず、血漿型酵素とは異なる脂質を基質としている可能性が示唆された。この結果に基づき、ヒト赤血球をA23187で刺激した場合の脂質分子種をESI/MS/MS法により分析したところ、酸化脂質分子種の量的変化は認められなかったが、16:0および18:0のアルキル鎖を持つPAFが増加することを見出した。赤血球膜のホスファチジルコリンは大部分がアシル型であることから、PAFよりもacylPAFの生成が多いことが予想されたが、実際には、PAFの生成がほとんどでありacylPAFの生成量は少なく、赤血球は量的に少ないlysoPAFから選択的にPAFを生成するメカニズムを持つことが明らかとなった。

研究成果

• [雑誌論文] Analysis of oxidized phosphatidylcholines using theoretically expanded multiple reaction monitoring with reversed-phase liquid chromatography/tandem mass spectrometry. (2007)
  • 著者名/発表者名: Yasuhiro Iida
  • 雑誌名: J. Am. Soc. Mass. Spectrom.
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Clinical aspects of plasma platelet-activating factor acetylhydrolase. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ken Karasawa
  • 雑誌名: Biochim. Biophys. Acta 1761 ページ: 1359-1372
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Clinical aspects of plasma platelet-activating factor acetylhydrolase (2006)
  • 著者名/発表者名: Ken Karasawa
  • 雑誌名: Biochim.Biophys.Acta 1761 ページ: 1359-1372
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Red blood cells highly express type I PAF-acetylhydrolase which consists of α_1/α_2 complex. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ken Karasawa
  • 雑誌名: J. Biochem. 138(4) ページ: 509-517
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Local expression of PAF-acetylhydrolase reduces accumulation of oxidized lipoproteins and inhibits inflammation, shear stress induced thrombosis, and neointima formation in balloon injured carotid arteries in non-hyperlipidemic rabbits. (2005)
  • 著者名/発表者名: Hideki Arakawa
  • 雑誌名: Circulation 111(24) ページ: 3302-3309
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Adenovirus mediated gene transfer and lipoprotein-mediated protein delivery of plasma PAF-acetylhydrolase ameliorates proteinuria in rat model oOf glomerulosclerosis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Naoyuki Iso-O
  • 雑誌名: Mol. Ther. 13(1) ページ: 118-126
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Red blood cells highly express type I platelet-activating factor acetylhydrolase (PAF-AH) which consists of α1/α2 complex. (2005)
  • 著者名/発表者名: Ken Karasawa, Mariko Shirakura, Noriko Satoh, Ayako Harada, Kazuaki Yokoyama, Morio Setaka, Keizo Inoue
  • 雑誌名: J. Biochem. 138 ページ: 509-517
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Local expression of platlet-activating factor-acetylydrolase reduces accumulation of oxidized lipoproteins and inhibits inflammation, shear stress-induced thrombosis, and neointima formation in balloon-injured carotid arteries in nonhyperlipidemic rabbits (2005)
  • 著者名/発表者名: Hideki Arakawa, Jian-Yong Qian, Dolgor Baatar, Ken Karasawa, Yujiro Asada, Yasuyuki Sasaguri, Elizabeth R. Miller, Joseph L. Wiztum, Hikaru Ueno
  • 雑誌名: Circulation. 111 ページ: 3302-3309
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Adenovirus-mediated gene transfer and lipoprotein-mediated protein delivery of plasma PAF-AH ameliorates proteinuria in rat model of glomerulosclerosis. (2005)
  • 著者名/発表者名: Naoyuki Iso-O, Hiroshi Noto, Masumi Hara, Masako Togo, Ken Karasawa, Noriko Ohashi, Eisei Noiri, Yoshiaki Hashimoto, Takashi Kadowaki, Satoshi Kimura, Tsuyoshi Watanabe, Kazuhisa Tsukamoto
  • 雑誌名: Ther 113 ページ: 118-126
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Analysis of oxidized phosphatidylcholines using theoretically expanded multiple reaction monitoring with reversed-phase liquid chromatography/tandem mass spectrometry.
  • 著者名/発表者名: Yasuhiro Iida, Takahiro Suzuki, Ken Karasawa, Takao Shimizu, Ryo Taguchi
  • 雑誌名: J. Am. Soc. Mass. Spectrom (in the press)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より