| 研究概要 |
本研究の最終目標は,これまで知られていないヒトタンパク質中の抗高血圧作用ペプチドにスポットを当て,高血圧症の予防もしくは治療に利用できる,ヒト由来ペプチドに基づいたツールを創製することである。本研究では,これらのヒトタンパク質由来の新規なアンジオテンシンI変換酵素阻害ペプチド(ACE)を発見し,その transition-states analogues からデザインされるレトロインバルソ型の選択的酵素阻害ペプチドアナログを創製することで新たな医薬品素材を提供する。
[研究の成果] 1.トリペプチドで最も阻害活性の強かった Leu-Ile-Tyr のレトロインバルソ型ペプチドを合成するため,末端 Tyr の電荷をアミノ基(+)からカルボキシル基(-)に変えるための合成ユニット mTyr-OtBu,t-butyl2-(4-hydroxyphenyl)methylmalonate を合成し,レトロインバルソ型ペプチドアナログ,m<d,1>Tyr-dalloIle-dLeu-NH_2,を固相法により合成し,HPLCを駆使してm_dTyr-dalloIle-dLeu-NH_2のみを分取した。
2.m_dTyr-dalloIle-dLer-NH_2のACE阻害活性を測定したところ,阻害の強さはL-型ノーマルペプチドLeu-Ile-Tyrの約1/200と.弱く,阻害の選択性も示さなかった。
3.あらためてC末端Trp残基が必須であるとわかったので,分子軌道計算ソフトAutodock4を用いてACEとVal-Ala-Trpとの結合をシミュレートしたところ,Val-Ala-Trpは既知のACE阻害剤リジノプリルや基質ペプチドとほぼ同じ位置に入ると計算上示され,さらにVal-Ala-TrpとVal-Ser-TrpのTrp残基の位置はほぼ同じであるとわかった。Trp残基が存在すると計算された位置に適切に結合する阻害剤を創製することで,選択的阻害剤を提供できる目処がついた。
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