研究課題
腫瘍細胞が腫瘤を作らず体腔液中で増える特徴をもつ原発性体腔内リンパ腫(PEL)息者がら樹立した2種類の細胞株において、通常のHQバンド分析と染色体特異的ペインテイングプローブを用いたFISH解析の結果、OS-1株では第5染色体上に、PSu株では第17染色体上に1q断片の挿入を認めた。さらに両腫瘍細胞株DNAと正常細胞DNAを用いたcGH法による解析から1q増幅領域はos-1株では1q21-q25、PSu株では1q25-q32と推定された。共通増幅領域と推定された範囲内を詳しく同定するために1q21-q32領域約53Mbにわたるコスミド、YAC、BACクローンによるFISH解析を施行した結果、OS-1株はA-B-C-B-Aタイブ(1q21→1q31←1q21)の、PSu株はC-B-A-B-C(1q32←1q31→1q32)タイプの重複ユニットから構成されていることが明らかになった。また、PSu株では1q31.3にマップされるBACクローンRP11-472J21が3コピー以上増幅していることもわか?た。この領域の増幅や1qトリソミーはAMLやCMLなど種々の血液系腫瘍や固形腫瘍においても報告されており、この領域に腫瘍特異的遺伝子変化が起こった結果、浮遊性の癌細胞になったと考えている。PEL両株における1q増幅が共通メカニズムに基づいている可能性を考えて、1q31.3-q32.1領域の重複複製起点を同定するためにより狭い領域の詳細なBACクローンFISH解析を進めたが、平成17年度から平成18年度の研究期間内に切断点に位置するゲノム断片の同定に至ってはいない。今後、唯一の手がかりとなるBACクローン472J21に注目して重複複製起点を含む前後の塩基配列を狭めて同定し、起点周辺の重複構造や塩基配列の特徴を明6かにしたい。その中に特徴的な配列を見いだし浮遊系と接着系の癌細胞を含む各種の培養細胞に導入して発現させることを計画している。発現細胞においてアンブリコンユニットの動態をファイバーFISH法により観察することで、細胞遺伝学的なアブローチから遺伝子増幅様式や増幅ユニット維持メカニズムを解明できるのではないかと期待している。また、各種の発現細胞のパターンを解析することから、細胞生物学的に、浮遊して増殖する病因メカニズムに迫りたい。
すべて 2006 その他
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Biochemical and Biophysical Research Communications 351
ページ: 853-859
The journal of Immunology (in press)
