| 研究課題/領域番号 |
17590392
|
|---|
| 研究機関 | 広島大学 |
|---|
研究代表者 |
小松澤 均 広島大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 助教授 (90253088)
|
|---|
| 研究分担者 |
菅井 基行 広島大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 教授 (10201568)
藤原 環 広島大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 助手 (90274092)
小原 勝 広島大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 助手 (80253095)
|
|---|
| キーワード | 黄色ブドウ球菌 / 薬剤耐性 / 糖代謝 |
|---|
| 研究概要 |
黄色ブドウ球菌のメチシリンおよびバンコマイシン感受性と糖の代謝系との関連性について明らかにするため、昨年度に続き以下の点について検討を行った。
1)GlmSのリボザイム解析:昨年度のglmSプロモーター解析の結果に基づき、種々のリボザイム領域の欠損したglmS遺伝子を作製し、黄色ブドウ球菌の系でGlmSの発現解析を行った。その結果、リボザイム領域を一部でも欠損することでN-アセチルグルコサミン添加によるGlmSの発現量の減少は抑制された。また、N-アセチルグルコサミン添加によるglmS-mRNAのリポザイム活性による特異的部位切断活性について定量性PCR法で検討した結果、N-アセチルグルコサミン添加により切断活性は増大したが、さらに特異的部位のみではなくmRNAそのものの分解能も増大していることが明らかになった。
2)PTS変異株の作製・性状解析:昨年度に引き続きPTS欠損株の作製を行った。結果、12株についての欠損株を作製した。メチシリン等の薬剤感受性試験を行ったが通常の顕著に変化した株は認められなかった。
3)CcpA変異株の作製および発現解析:グルコース代謝のグローバル調節性因子のCcpAの変異株を作製し、薬剤感受性試験を行った。結果、メチシリンの耐性度の減少が認められた。また、マイクロアレイ解析によりCcpAの結合配列(Cre配列)を有する遺伝子の中で実際にCcpAにより発現に変化を及ぼす因子が同定できた。また、併せてCcpAの欠損により影響を受ける遺伝子群の同定ができた。
4)種々の糖添加によるマイクロアレイ解析:グルコース、フルクトース、ラクトース、ガラクトース等の種々の糖を添加した際の発現解析をマイクロアレイにより検討し、それぞれの糖に関与するPTSを明らかにした。また、種々の糖存在下において特異的に変化する因子についてもスクリーニングが行えた。
|
