EBウイルス依存性に発現変化する細胞遺伝子群の網羅的解析

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17590418
• 研究機関: 高知大学
• 研究代表者: 今井 章介 高知大学, 医学部, 教授 (60232592)
• 研究分担者: 黒田 正幸 高知大学, 医学部, 助手 (00253005) ; 松本 健治 国立成育医療研究センター研究所, 免疫アレルギー研究部, 室長 (60181765)
• キーワード: EBウイルス / 発癌責任遺伝子 / マイクロアレイ / 上皮細胞 / T / NK細胞

研究概要

EBV感染細胞から迅速かつ効率的にEBVゲノムを駆逐するユニークなシステムと、GeneChipマイクロアレイ解析法を活用することにより、EBV(EBV遺伝子)によって発現が変化する上皮細胞、ならびにT/NK細胞遺伝子群の網羅的探索、特定を目指した解析を実施し、本年度に以下のような成果を得た。
1)最近、申請者らが独自に開発した効率的なEBV駆逐分子dominant-negative EBNA1(DNE1; Mol.Ther., 11(4):578-90,2005)をアデノウイルスベクター(5型ベクター、ファイバー置換5型ベクター)を用いてEBV陽性の上咽頭癌細胞株およびT/NK腫瘍細胞株に導入発現させたところ、3〜6日目に細胞集団の60〜90%でEBVゲノムの脱落をウェスタンブロット、real-time PCR、EBER1 in situ hybridization法などにて確認した。
2)WST-1アッセイ、軟寒天培地中のコロニー形成能を指標に検討したところ、DNE1導入細胞ではEBVゲノム脱落に一致して、有意な増殖能の低下を認めた。
現在、これらEBVゲノム脱落細胞とEBV陽性の親細胞をもとに、GeneChipマイクロアレイ解析を開始、きわめて知見に乏しかった非B細胞性腫瘍の成因に果たすEBVの機能とその分子メカニズムの解明作業が進行している。さらに、テトラサイクリンによる遺伝子発現制御法にて全細胞で一斉にDNE1発現を誘導する解析系も並行して構築中であり、これを利用して、より明確な差異を出すことを試みている。

研究成果

• [雑誌論文] Absence of Chlamydia psittaci in ocular adnexal lymphoma from Japanese patients. (2006)
  • 著者名/発表者名: Daibata M
  • 雑誌名: Brit J Haematol 132 ページ: 651-652
• [雑誌論文] Secretory IgA, peroxidase, and catalase-mediated microbicidal activity during H2O2 catabolism in viridans streptococci pathogen co-aggregation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Uehara Y
  • 雑誌名: J.Infect.Dis (印刷中)
• [雑誌論文] EBVと胃癌.「特集 ヘルペスウイルス学-基礎・臨床研究の進歩」 (2006)
  • 著者名/発表者名: 今井章介
  • 雑誌名: 日本臨床 64(3) ページ: 651-656
• [雑誌論文] 難治性EBウイルス関連疾患に対する新たな治療戦略 (2006)
  • 著者名/発表者名: 今井章介
  • 雑誌名: 臨床とウイルス (印刷中)
• [雑誌論文] EBウイルスと胃癌 (2006)
  • 著者名/発表者名: 今井章介
  • 雑誌名: 臨床消化器内科 (印刷中)
• [雑誌論文] Bacteriophage therapy - A revitalized therapy against bacterial infectious diseases. (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki S
  • 雑誌名: J Infect Chemother 11 ページ: 211-219
• [雑誌論文] Infantile Eczema at One Month of Agels Associated with Cord Blood Eosinophilia and Subsequent Development of Atopic Dermatitis and Wheezing IIInes until Two Years of Age. (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsumoto K
  • 雑誌名: Int Arch Allergy Immunol 137(suppl 1) ページ: 69-76
• [雑誌論文] Bacteriophage therapy. (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki S
  • 雑誌名: Recent Res Develop Virol, Transworld Research Network, Trivandrum, India(S.G.Pandalai(ed.)) 7 ページ: 1-11
• [雑誌論文] Eradication of Epstein-Barr virus episome and associated inhibition of infected tumor cell growth by adenovirus vector-mediated transduction of dominant-negative EBNA1. (2005)
  • 著者名/発表者名: Nasimuzzaman Md
  • 雑誌名: Mol Ther 11(4) ページ: 578-590
• [雑誌論文] Induction of lytic Epstein-Barr virus(EBV) infection by synergistic action of rituximab and dexamethasone renders EBV-positive lymphoma cells more susceptible to ganciclovir cytotoxicity in vitro and in vivo. (2005)
  • 著者名/発表者名: Daibata M
  • 雑誌名: J Virol 79(9) ページ: 5875-5879
• [雑誌論文] Bacteriophage therapy-A short review. Recent Res. (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsuzaki S
  • 雑誌名: Recent Res.Devel.Virol 7 ページ: 1-11
• [雑誌論文] Proposed guidelines for diagnosing chronic active Epstein-Barr virus infection. (2005)
  • 著者名/発表者名: Okano M
  • 雑誌名: Am J Hematol 80 ページ: 64-69
• [雑誌論文] 胃発癌にかかわる因子とその重み- EBウイルスからの検討 (2005)
  • 著者名/発表者名: 今井章介
  • 雑誌名: The GI Forefront(メディカルレビュー社) 1(1) ページ: 21-23
• [雑誌論文] Dominant-negative EBNA1によるEBウイルス腫瘍の抑制. (2005)
  • 著者名/発表者名: 今井章介
  • 雑誌名: ウイルス 55(2) ページ: 239-250