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(1) BALB/c mouseのsyngenic cell line Renca細胞にHBX蛋白を表現するウィルス(adeno-HBXおよびHBX knockoutのadeno-HBXOを感染させ、HBX蛋白の発現をwestern blotにて確認した(HBX蛋白はadeno-HBXで発現しadeno-HBXOで発現はなかった)。
(2)Adeno-HBXおよびadeno-HBXOをRenca細胞にM.O.I.=0.5で感染させ2日後にMHC Class I(H-2^d)の発現をFlow cytometerにて測定した。adeno-HBX感染細胞においてMHC Class Iの発現はadeno-HBXO感染細胞に比し低下していた。既報告にてHBX蛋白がProteasome機能障害を起こすことが確認されているため、細胞においても同機序にてMHC class I発現を抑制したものと考えられた。
(3)BALB/cマウスにadeno-Lac2を2週間毎2回腹腔内投与にて感染させた後、脾内リンパ球をさらにex vivoにてadeno-Lac2を感染させた後、Adeno-HBXまたはHBXOを感染させたRenca細胞を標的細胞とし(共通抗原:adeno蛋白)細胞障害活性測定(CTL)(chromium releasingl assay)を施行したところadeno-HBX感染標的細胞ではadeno-HBXO感染標的細胞に比較してCTL活性は抑制されていた。
(4)vvHBXまたはvvLacZをマウスに上記と同様に腹腔内投与した後、1週間ex vivoにてvvHBXまたはvvLacZとともにそれぞれ培養しWR感染標的細胞に対する細胞障害活性を測定した。現在、これらの確認実験および定量化のためサイトカインの測定etcを施行している。
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