肺結核感染症に対する次世代粘膜ワクチンの開発

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17590784
• 研究機関: 浜松医科大学
• 研究代表者: 須田 隆文 浜松医科大学, 医学部, 助手 (30291397)
• 研究分担者: 千田 金吾 浜松医科大学, 医学部, 助教授 (40197611) ; 永田 年 浜松医科大学, 医学部, 助教授 (90275024)
• キーワード: 樹状細胞 / 結核 / ワクチン

研究概要

common mucosal immune system (CMIS)を利用して,粘膜面に効率よく防御免疫を誘導する肺結核感染症に対する粘膜ワクチンを開発するために,結核菌由来の感染防御抗原を遺伝子導入したDCや,変異リステリア菌,改変型アデノウイルスを経鼻あるいは経気道的に投与し,そのワクチンとしての有用性を検討した.今年度は,以下のワクチンを作製した.
結核菌由来の抗原蛋白(Ag85A,Ag85B,MPB51)の遺伝子を組み込んだ以下のワクチンを作製
(1)遺伝子導入DCワクチンの作成
1.ウイルス・ベクターおよび感染レトロウイスル粒子の作成:結核菌の感染防御蛋白であるAg85A,Ag85B,MPB51のcDNA(plasmidは長崎大学歯学部から供与)をそれぞれpMXベクターに挿入する.また,コントロールとしてGFPのcDNAを挿入したpMXも作成した.各種ウイルスおよびコントロール・ベクターを,retrovirus-producer cell (Phoenix cell)にtransfectionして培養液から感染レトロウイルス粒子を回収した.
2.DCへの遺伝子導入:感染レトロウイルス粒子を,spin infection法を用いてマウス(BALB/c)骨髄由来の培養DCに感染させて遺伝子導入を行い,DCワクチンを作製した.

研究成果

• [雑誌論文] Immunization with dendritic cells retrovirally transduced with mycobacterial antigen 85A gene elicits the specific cellular immunity including cytotoxic T-lymphocyte activity specific to an epitope on antigen 85A (2006)
  • 著者名/発表者名: Nakano H, Suda T, et al.
  • 雑誌名: Vaccine 24(12) ページ: 2110-2119
• [雑誌論文] alpha-Galactosylceramide, a ligand of natural killer T cells, inhibits allergic airway inflammation (2005)
  • 著者名/発表者名: Matsuda H, Suda T, et al.
  • 雑誌名: Am J Respir Cell Mol Biol 33(1) ページ: 22-31
• [雑誌論文] Impaired toll-like receptor 9 expression in alveolar macrophages with no sensitivity to CpG DNA (2005)
  • 著者名/発表者名: Suzuki K, Suda T, et al.
  • 雑誌名: Am J Respir Crit Care Med 171(7) ページ: 707-713
• [雑誌論文] Suplatast tosilate alters DC1/DC2 balance in peripheral blood in bronchial asthma (2005)
  • 著者名/発表者名: Yokomura K, Suda T, et al.
  • 雑誌名: J Asthma 42(7) ページ: 567-570