マシャド・ジョセフ病遺伝子産物の結合タンパク解析による分子病態解明の研究

2005 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17590858
• 研究機関: 筑波大学
• 研究代表者: 吉澤 利弘 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 講師 (50212311)
• キーワード: ポリグルタミン病 / マシャド・ジョセフ病 / 神経細胞死

研究概要

ポリグルタミン病の一つであるマシャド・ジョセブ病における神経細胞死選択性と細胞死に至る分子病態の両者にアプローチすることを目的としてyeast two hybrid法を用いたataxin-3結合タンパクの探索を行った。具体的にはataxin-3のN末側286残基をbaitとしてヒト脳のcDNAライブラリーをスクリーニングした。その中で、特に結合の強かったクローンを選別し、そのシークエンスを決定したところ、グリシンの代謝に関係する酵素をコードしていることが明らかになった。このクローン(以下YF156と略称)は、yeast two hybrid法で観察するかぎりataxin-3のN末のみならず全長とも結合し、またataxin-3のポリグルタミン鎖が10個の時のみならず77個の時も同様な結合を示した。また一連の欠失実験から、YF156はそのN末側にミトコンドリア移行シグナルを有し、その部分がataxin-3の最もN末側と結合しているものと考えられた。さらにYF156のN末側にFLAG tagをつけたタンパクとataxin-3(Q10/77)を同時にHEK293細胞に発現させてFLAG抗体にて免疫沈降した場合、実際にataxin-3が免疫沈降してくることから、哺乳動物の細胞内でもYF156とataxin-3(Q10/77)全長が結合することが示された。この結合がどのような意義を有するのかを検討するために、培養細胞内でのYF156とataxin-3(Q10/77)の共発現の実験を行った。その結果、ataxin-3(Q77)のみがYF156の細胞内分布を変化させる可能性が明らかとなり、これが分子病態に関わっているのではないかと現在予測している。(これらの成果はいずれも投稿準備中。)

研究成果

• [雑誌論文] ANCA-associated vasculitis (AAV) causing bilateral cerebral infarction and subsequent intracerebral hemorrhage without renal and respiratory dysfunction. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ito Y, Suzuki K, Yamazaki T, Yoshizawa T, Ohkoshi N, Matsumura A
  • 雑誌名: Journal of Neurological Sciences 240 ページ: 99-101
• [雑誌論文] A novel GRPase, CRAG, mediates PML-associated nuclear body formation and degradation of expanded polyglutamine protein (2006)
  • 著者名/発表者名: Qin Q, Inatome R, Hotta A, Kijima M, Yamamura H, Hirai H, Yoshizawa T, Tanaka H, Fukami K, Yanagi S
  • 雑誌名: J Cell Biol (in press)
• [雑誌論文] Ectoine alters subcelluar localization of inclusions and reduces apoptotic cell death induced by the truncated Machado-Joseph disease gene product with an expanded polyglutamine stretch. (2005)
  • 著者名/発表者名: Furusho K, Yoshizawa T, Shoji S
  • 雑誌名: Neurobiology of Disease 20 ページ: 170-178
• [雑誌論文] Choreaで発症し、抗VGKC抗体陽性を認めた膀腫瘍性神経症候群が疑われる1例 (2005)
  • 著者名/発表者名: 大越教夫, 石井亜紀子, 渡邊雅彦, 中馬越清隆, 望月昭英, 吉澤利弘, 庄司進一
  • 雑誌名: 運動障害 13 ページ: 23-26
• [雑誌論文] MRミエログラフィーが漏出部位推定に有用であった特発性髄液圧症候群の1例 (2005)
  • 著者名/発表者名: 上野卓教, 吉澤利弘, 町野 毅, 庄司進一, 阿武 泉
  • 雑誌名: 日本内科学会雑誌 94 ページ: 2382-2384
• [雑誌論文] MRIで髄内病変を明確に描出し得た長期経過のflexion myelopathy. (2005)
  • 著者名/発表者名: 辻 浩史, 吉澤利弘, 玉岡 晃
  • 雑誌名: 神経内科 63 ページ: 299-300