研究概要 |
CMTは遺伝性ニューロパチーの中で最も有病率の高い疾患であり,その中でMPZ変異はPMP22 duplicationに次いで多く,100種類以上の変異が報告されている.細胞外ドメインにおける変異に見られる重症の脱髄型とそれ以外の部位に見られる軸索型が存在する.脱髄型のマウスモデルは既に作製されているが,軸索型の報告はない. MPZ遺伝子内のintronがその遺伝子発現に重要と報告されていることにより,まず,変異を有するMPZをクローニングするため,上記軸索型変異を持つ患者サンプルより,genomic libraryを作成した.しかし,full sizeのMPZ遺伝子の陽性クローンを得ることはできなかった.次ぎに,MPZ cDNAを得るため,人の末梢神経よりRNAを抽出し,full sizeのクローンを確認できた.このwild MPZ cDNAクローンに変異導入を行ない,コントロールとしての脱髄型変異および軸索型変異のそれぞれのクローンの作成に成功した. 軸索型マウスの作製には,シュワン細胞での適切なMPZの遺伝子発現が必要なことが予想されている.したがって,従来のCMV enhancerとbeta-action promotorを組み合わせたベクターに加え,CNTF promotorによる発現誘導を検討している.これはミエリン化シュワン細胞において,定常的に発現するCNTFの調節にあたっており,beta-actionのそれより発現誘導能も低く,軸索型トランスジェニックマウス用の発現ベクターとして最も適切である.
|