血管平滑筋細胞の分化抑制因子LR11の解析と臨床応用

2006 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 17590917
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 代謝学
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 武城 英明 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (80291300)
• 研究分担者: 卯木 浩之 千葉大学, 大学院医学研究院, 助手 (40323290) ; 齋藤 康 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (50101358)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• キーワード: 動脈硬化 / 平滑筋細胞 / 血管 / 遊走 / 分化

研究概要

平滑筋細胞の幼若化現象は一定の生体反応としてとらえられている。動脈硬化巣にみられるこのような平滑筋細部の変化は連続したものであり、多彩な様相を呈する。病巣内での分化、脱分化の機序を明らかにすることは、病巣の形成および治癒過程の機序を解明するものである。本研究の目的は、動脈壁内膜に発現し遊離型分化抑制因子LR11の平滑筋細胞における発現動態、脱分化作用機序を明らかにすることである。本年度下記について終了した。
1.LR11ノックアウトマウスの作成
Lr11-/-、Lr11-/+マウス共に出生、成長に明らかな障害を認めなかった。LR11-/-の大腿動脈にカフ傷害を行うことにより内膜肥厚をLR11+/+マウスと比較した。LR11-/-マウスの傷害一ヶ月後の内膜肥厚はLR11+/+マウスに比べて有意に抑制された。LR11-/-マウス大動脈より培養平滑筋細胞を調整した。PDEF刺激下の遊走能はLR11+/+マウスに比べて有意に低下していた。
2.遊離型LR11の機能解析
ウサギLR11cDNAより膜貫通領域および細胞内域を欠失したcDNAを作成しCOS細胞に発現させ分泌可能型LR11蛋白を調整した。分泌可溶型LR11は、平滑筋細胞の遊走能促進作用に加えて、培養マクロファージの接着能、脂質蓄積能を亢進した。
3.薬剤によるLR11遺伝子発現調節
平滑筋細胞のLR11遺伝子発現はPDGF-BBにより誘導され、ピタバスタチンにより濃度依存性に抑制された。LR11過剰発現細胞の亢進した遊走能はスタチンにより抑制されなかった。
これらの研究成果から、動脈壁内に発現し遊離型分化抑制因子LR11の平滑筋細胞における発現動態、作用機序を明らかにすることに成功した。本研究成果は交付申請書に計画したものであり、ほぼ100%の研究成果を得た。

研究成果

• [雑誌論文] A Secreted Soluble Form of LR11, Specifically Expressed in Intimal Smooth Muscle Cells, Accelerates Formation of Lipid-Laden Macrophages. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ohwaki K, Bujo H, Jiang M, Yamazaki H, Schneider WJ, Saito Y
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb Vasc Biol. (Published online)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] A Selected Soluble Form of LR11, Specifically Expressed in Intimal Smooth Muscle Cells Accelerates Formation of Lipid - Laden Macrophages. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ohwaki K, Bujo H, Yamazaki H, Schneider WJ, Saito Y.
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb Vasc Biol. Published on line
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Pitavastatin attenuates the PDGF-induced LR11/uPA receptor-mediated migration of smooth muscle cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Jiang M, Bujo H, Zhu Y, Yamazaki H, Hirayama S, Kanaki T, Shibasaki M, Takahashi K, Schneider WJ, Saito Y
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 348(4) ページ: 1367-1377
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Modulation of smooth muscle cell migration by members of the low-density lipoprotein receptor family. (2006)
  • 著者名/発表者名: Bujo H, Saito Y.
  • 雑誌名: Arterioscler Thromb Vasc Biol. 26(6) ページ: 1246-1252
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Pitavastatin attnuate the PDGF-induced LR11/u PA receptor mediate migragion of smooth muscle cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Jiang M, Bujo H, Zhu Y, Yamasaki H, Hirayama S, Kanakki T, Shibasaki M, Takahashi K, Schneid or WJ, Saito Y.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 348(4) ページ: 1367-1377
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Modulation of smooth muscle cell migration by members of the low-density lipoprotein receptor family. (2006)
  • 著者名/発表者名: Bujo H, Saito Y.
  • 雑誌名: Arterioscler Thomb Vasc Biol 26(6) ページ: 1246-1252
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] LRP1B is a negative modulator of increased migration activity of intimal smooth muscle cells from rabbit aortic plaques. (2005)
  • 著者名/発表者名: Seki N, Bujo H, Jiang M, Tanaga K, Takahashi K, Yagui K, Hashimoto N, Schneider WJ, Saito Y
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 331(4) ページ: 964-970
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] LRP1B is a negative modulator of increased migration activity of intimal smooth muscle cells from rabbit aortic plaques. (2005)
  • 著者名/発表者名: Seki N, Bujo H, Tanaga K, Takahashi K, Yagui K, Hashimoto N, Schneider WJ, Saito Y.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 331(4) ページ: 964-970
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より