白血病におけるFLT3とインテグリンシグナル伝達系のクロストーク

2006 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 17590989
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 血液内科学
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 勝見 章 名古屋大学, 大学院医学系研究科, 特任講師 (80378025)
• 研究分担者: 貝淵 弘三 名古屋大学, 大学院医学系研究科, 教授 (00169377) ; 直江 知樹 名古屋大学, 大学院医学系研究科, 教授 (50217634)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• キーワード: インテグリン / FLT3 / チロシンキナーゼ / PI3K / 細胞接着 / 細胞外マトリックス / 急性白血病

研究概要

野生型並びに変異FLT3遺伝子導入をした32D細胞、FLT3/ITD変異を持つヒト白血病細胞株(MOLM13,NAMO-2など)を用いて1)FLT3遺伝子異常とインテグリン機能の関連、2)インテグリン活性化に関与するシグナル伝達系の解明につき基盤的研究を行い下記の結果を得た。
1.FLT3の恒常的活性化により白血病細胞のフィブロネクチン(FN)への接着が亢進していることが判明した。
2.マウス骨髄由来ストローマ細胞HESS-5との接着によってのみ生存、増殖することができるヒト白血病細胞株NAMO-2はFLT3/ITD変異を有している.HESS-5上に接着したNAMO-2細胞にFLT3阻害剤を加えることにより接着が阻害されることが明らかになった。
3.我々はVCAM1-Fcキメラ蛋白を使用したFACSによるα4β1インテグリン活性測定系を確立した。FLT3/ITD発現32D細胞にFLT3阻害剤を加えることによりα4β1インテグリン活性が低下することが証明された。一方で野生型FLT3発現32D細胞にFLT3 ligandを添加したところα4β1インテグリン活性上昇が証明された。以上のことから変異FLT3シグナルはα4β1インテグリンの活性(inside-out signaling)を亢進させることが強く示唆された。
4.我々はNIH3T3細胞においてインテグリン活性化にPI3Kが必要であることを証明した。また活性化インテグリンは新たな細胞外マトリックスへの結合を介してSAPK/JNKのリン酸化を誘導することが明らかになった。
以上の研究により恒常的活性化FLT3がインテグリン活性化を介して白血病細胞のFNやストローマ細胞上への接着を制御していることが証明された。FLT3/ITD変異を有する白血病の予後に骨髄ニッチへの接着による白血病細胞の残存が関与している可能性がある。

研究成果

• [雑誌論文] Homing, proliferation and survival sites of human leukemia cells in vivo in immunodeficient mice. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ninomiya M, Abe A, Katsumi A, et al.
  • 雑誌名: Leukemia 21 (1) ページ: 136-142
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Homing, proliferation and survival sites of human leukemia cells in vivo in immunodeficient mice. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ninomiya M, Abe A, Katsumi A. Naoe T et al.
  • 雑誌名: Leukemia. 21(1) ページ: 136-142
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Establishment of Stroma Dependent Human Acute Myelomonocytic Leukemia Cell Line, NAMO-2 with FLT3 Tandem Duplication. (2006)
  • 著者名/発表者名: Abe A et al.
  • 雑誌名: Int J. Hematol. 84(4) ページ: 328-336
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Recurrent intramural hematoma of small intestine in a severe hemophilia A patient with high titer of factor VIII inhibitor. (2006)
  • 著者名/発表者名: Katsumi A et al.
  • 雑誌名: Int J. Hematol. 84(2) ページ: 166-169
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] High Titer of ADAMTS13 Inhibitor Associated with Thrombotic Microangiopathy of the Gut and Skeletal Muscle after Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Adachi T et al.
  • 雑誌名: Int J Hematol. 83(5) ページ: 415-419
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Fatal thrombosis of antithrombin-deficient mice is rescued differently in the heart and liver by intercrossing with low tissue factor mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Hayashi M et al.
  • 雑誌名: J Thromb Haemost. 4(1) ページ: 177-185
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification of amino acid residues essential for heparin binding by the A1 domain of human von Willebrand factor. (2006)
  • 著者名/発表者名: Adachi T et al.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 339(4) ページ: 1178-1183
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Establishment of Stroma Dependent Human Acute Myelomonocytic Leukemia Cell Line, NAMO-2 with FLT3 Tandem Duplication. (2006)
  • 著者名/発表者名: Abe A, Kiyoi H, Ninomiya M, Yamazaki T, Murase T, Ozeki K, Suzuki M, Hayakawa F, Katsumi A. Emi N, Naoe T.
  • 雑誌名: Int J.Hematol. 84(4) ページ: 328-36
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Recurrent intramural hematoma of small intestine in a severe hemophilia A patient with high titer of factor VIII inhibitor. A case report and a review of the literatures. (2006)
  • 著者名/発表者名: Katsumi A Matsushita T, Hiroshima K, Iwasaki T, Adachi T, Yamamoto K, Kojima T, Takamatsu J, Saito H, Naoe T.
  • 雑誌名: Int J.Hematol. 84(2) ページ: 166-9
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] High Titer of ADAMTS13 Inhibitor Associated with Thrombotic Microangiopathy of the Gut and Skeletal Muscle after Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Adachi T, Matsushita T, Ichihashi R, Hirashima K, Ito M, Inukai A, Yokozawa T, Nishida T, Murata M, Hayashi M, Katsumi A. Kojima T, Saito H, Naoe T.
  • 雑誌名: Int J Hematol. 83(5) ページ: 415-9
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Fatal thrombosis of antithrombin-deficient mice is rescued differently in the heart and liver by intercrossing with low tissue factor mice. _ (2006)
  • 著者名/発表者名: Hayashi M, Matsushita T, Mackman N, Ito M, Adachi T, Katsumi A, Yamamoto K, Takeshita K, Kojima T, Saito H, Murohara T, Naoe T.
  • 雑誌名: J Thromb Haemost. 4(1) ページ: 177-85
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Identification of amino acid residues essential for heparin binding by the Al domain of human von Willebrand factor. (2006)
  • 著者名/発表者名: Adachi T, Matsushita T, Dong Z, Katsumi A.Nakayama T, Kojima T, Saito H, Sadler JE, Naoe T.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 339(4) ページ: 1178-83
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より