| 研究概要 |
急性前骨髓球性白血病(APL)に高頻度に発現するPML-RARαは、レチノイン酸受容体標的遺伝子の発現を異常に抑制し、白血病の病態形成に関与すると考えられている。われわれは、白血病治療の新規分子標的を探索するために、全トランスレチノイン酸(ATRA)非存在下においてin vivoでPML-RARαに結合し転写を抑制する、転写調節因子複合体蛋白の同定を試みた。はじめに、293T細胞にPML-RARαを強制発現させた系において蛋白免疫沈降法を行い、内因性のN-CoR(Nuclear Receptor Co-Repressor)とヒストン脱アセチル化酵素3(HDAC3)がATRA非存在下においてPML-RARαと結合することを確認し、その結合がATRA存在により解離することを見いだした。この系においてクロマチン免疫沈降法を施行し、内因性のN-CoR/HDAC3がATRA非存在下においてPML-RARαを介して内因性の標的遺伝子(RARβ,CYP26)プロモーター上にリクルートされることを確認した。さらに、siRNAによる内因性HDAC3の発現ノックダウンを試みた。293T細胞にsiHDAC3発現ベクターを導入しsiHDAC3を発現させることにより、内因性HDAC3の発現がmRNA,蛋白レベルともに抑制されることを確認した。PML-RARα発現下において、標的遺伝子RARβ,CYP26の転写は抑制されるが、この系においてsiHDAC3を発現させることにより、これらの標的遺伝子の発現は活性化(脱抑制)された。以上の結果から、HDAC3はPML-RARαによる標的遺伝子発現抑制に対し、重要な役割を果たすことが強く示唆された。これらの結果を踏まえ、18年度はHDAC3,N-CoR等を分子標的とした新規白血病治療の可能性につき、in virtoでの検討を進める予定である。
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