| 研究概要 |
本年度はマウスのMRIの計測機器を作成、並びに、ヒトとマウスのモデルの病理学的評価をおこなった。
1)マウスの磁気共鳴画像法の開発
マウスの鮮明な拡散画像を得るために、予備実験において用いたコイルを改良し精度の高いMRIプローブの開発を行った。である。磁場の均一性と高い信号強度の得るために直径27mmの円形コイルを2個組み合わせたサドルコイルである。動物用磁気共鳴装置(ブルカー社BIOSPEC BMT24/40 2.4Tesla)を用いwild typeのマウスに対して施行した。拡散強調画像法として既に独立行政法人産業技術総合研究所でラットに対して用いられているパルスシーケンスをマウスMRIに応用した。実用的な画像が得られ、今後、パルスシーケンスの調整を行っていく予定である。さらに、髄鞘の質的解析をするために、みかけの拡散係数(apparent diffusion coefficient : ADC)を測定するためのパルスシーケンスを開発する。
2)shiverer mouseの病理学的検索
shiverer mouseのnull mutant (mbp-/-), heterozygous mutant (mbp+/-)及びwild typeについて、血液を採取しMBP遺伝子をPCR法で検出し遺伝形質を評価した。さらに、生後14,21,35,42日のマウスの脳の病理学的評価を行った。髄鞘形成は、抗myelin basic protein(MBP)抗体、抗proteolipid protein(PLP)抗体による免疫染色とKluver-Barrera(KB)染色を用いて評価し、同時に電子顕微鏡で髄鞘の微細構造を検討する。また、グリオーシスは、Holtzer染色や抗glial fibrillary acidic protein(GFAP)抗体による免疫染色を用いて評価した。ヒトのモデルである18番染色体長腕欠失(18q-)症候群と同様にheterozygous mutantとwild typeには有意な差異は見出せなかった。null mutantではKB染色およびMBP抗体、PLP抗体による免疫染色で髄鞘形成障害がみとめられた。shiverer mouseは髄鞘形成障害のモデル動物として有用である。
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