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強皮症培養線維芽細胞ではコラーゲンなどの細胞外マトリックス発現亢進によって線維化していると考えられているが、その原因としてTGF-βが主役となっていると考えられ、その機序を明らかにする事は非常に重要である。TGF-β情報伝達のnegative feed back機構を司る癌遺伝子Skiについて検討した。
正常および強皮症培養線維芽細胞を用いて免疫プロット法にてSki蛋白の発現量を検討したところ強皮症線維芽細胞において発現が亢進していた。Northern blot法にて強皮症線維芽細胞においてSki mRNAの発現が亢進していた。皮膚組織を用いた免疫染色法にて強皮症線維芽細胞におけるSkiの発現亢進がin vivoで確認された。また正常線維芽細胞ではTGF-β刺激にてSkiの発現が亢進したが、強皮症線維芽細胞ではSkiの発現が恒常的に亢進しており、TGF-β刺激にてSkiの発現に変化はなかった。さらに正常線維芽細胞ではTGF-β刺激にてSkiとSmad3およびSkiとSmad4の介合が亢進したが、強皮症線維芽細胞では恒常的にSkiとSmad3およびSkiとSmad4の介合が亢進しており、TGF-β刺激にて変化はなかった。
また正常線維芽細胞ではTGF-β刺激にて亢進したI型コラーゲン蛋白発現、I型コラーゲンmRNA発現、α2(I)コラーゲン遺伝子転写活性が、Skiの強発現によって全て抑制された。しかしながら、強皮症線維芽細胞では恒常的に亢進したI型コラーゲン蛋白発現、1型コラーゲンmRNA発現、α2(I)コラーゲン遺伝子転写活性が、Skiの強発現によって全く抑制されなかった。
以上の結果は、強皮症線維芽細胞におけるTGF-β情報伝達の異常を示し、強皮症培養線維芽細胞ではautocrine TGF-β signaling(強皮症線維芽細胞自身が分泌するTGF-βが活性化してTGF-β情報伝達が亢進した結果)によってコラーゲンなどの細胞外マトリックス発現亢進によって線維化していると考えられているが、Skiの過剰発現はautocrine TGF-β signalingによるものであり、さらにautocrine TGF-β signalingの維持に関与するものと考えられた。
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