分子遺伝学的手法を用いた超低侵襲な肝生検診断法の開発

2006 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 17591411
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 消化器外科学
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 田中 文明 九州大学, 大学病院, 助手 (30332836)
• 研究分担者: 吉武 慎一郎 九州大学, 大学病院, 講師 (80315142)
• 研究期間 (年度): 2005 – 2006
• キーワード: 肝炎 / 肝硬変 / 遺伝子診断 / マイクロアレイ / 針生検

研究概要

1.分子遺伝学的な肝障害度評価
現時点で合計121例の解析をオリゴアレイにて実施した。Azan染色による肝線維化率(MFI)の測定には十分な非癌部切除例に限られるため測定可能であったのは、合計81例であった。
2.B型慢性肝炎、C型慢性肝炎の比較
C型で多く発現する遺伝子の多くはInterferon関連分子やImmune functionに関与するものであった。リストの上位に位置するGIP2やIFI27はHCV陽性肝細胞癌の癌部にて高発現する遺伝子であった。これらの遺伝子リストはB型、C型の違いにより同定した者であるが、多くの遺伝子はC型とそれ以外に分かれ、NBNC型はB型に類似していた。
3.極細肝生検針による評価の再現性の確認と更なる細径化
肝生検針(ACECUT)を用いて、18G:30.4±4.4μg、20G:15.3±1.4μgのtotal RNAを採取可能であり、同一症例での解析結果は同じクラスターに分類されることを示した。また、肝生検針を用いて、22G:4.9±0.9μg、23G:3.4±0.5μgのtotal RNAを採取可能であることが確認でき、全体でクラスター解析すると同一症例からの切除組織と肝生検組織は同じクラスターに分類された。
4.最終的な遺伝子の絞り込み
上記の結果より、B型とC型肝炎の遺伝子発現の違いが明なとなったため肝障害の程度を評価するにもB型とC型は別々に評価すべきと考えられる。そこでまず、C型肝炎症例に絞って肝繊維化率と遺伝子発現の関連を解析した。現時点でtraining sample (n=30)でR=0.86、test sample (n=7)でR=0.82とよい結果を得ている。
5.極細肝生検針よりられた74症例からの標本を用いてマイクロアレイを行い、最終的に39遺伝子を同定した。その中でMHC-class II関連遺伝子が最も有効に炎症状態を反映した。また、PIK3C2B、ARHGDIBなどの幹細胞の活性化を司る遺伝子も含まれており、これらが肝炎の分子病因予測因子となる可能性が示された。

研究成果

• [雑誌論文] Identification of overexpressed genes in hepatocellular carcinoma, with special reference to ubiquitin-conjugating enzyme E2C gene expression. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ieta K, Ojima E, Tanaka F, Nakamura Y, Haraguchi N, Mimori K, Inoue H, Kuwano H, Mori M
  • 雑誌名: Int J Cancer. 121 ページ: 2787-2792
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] TIMP-3 and Phosphatidylinositol 3-kinase Genes Were Found to Be Related to the Progression of Colon Cancer in a Comparison of Pneumoperitoneum and Laparotomy in a Murine Model. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tanaka F, Sonoda H, Okamoto M, Mimori K, Utsunomiya T, Inoue H, Hanai T, Mori M
  • 雑誌名: Surg Today 37 ページ: 220-225
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Opa Interacting Protein 5 (OIP5) Is a Novel Cancer-testis Specific Gene in Gastric Cancer. (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Y, Tanaka F, Nagahara H, Ieta K, Haraguchi N, Mimori K, Sasaki A, Inoue H, Yanaga K, Mori M
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol. 14 ページ: 885-892
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Identification of overexpressed genes in hepatocellular carcinoma, with special reference to ubiquitin-conjugating enzyme E2C gene expression. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ieta K, Ojima E, Tanaka F, Nakamura Y, Haraguchi N, Mimori K, Inoue H, Kuwano H, Mori M
  • 雑誌名: Int J Cancer 121(1) ページ: 2787-2792
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] TIMP-3 and phosphatidylinositol 3-kinase genes were found to be related to the progression of colon cancer in a comparison of pneumoperitoneum and laparotomy in a murine model. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tanaka F, Sonoda H Okamoto M, Mimori K, Utsunomiya T, Inoue H, Hanai T, Mori M
  • 雑誌名: Surg Today 37(3) ページ: 220-225
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Opa interacting protein 5 (OIP5)is a novel cancer-testis Specific gene in gastric cancer. (2007)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Y, Tanaka F, Nagahara H, Ieta K, Harauchi N, Mimori K, Sasaki A, Inoue H, Yanaga K, Mori M
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol 14(2) ページ: 885-892
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Efficient induction of specific cytotoxic T lymphocytes to tumor rejection peptide using functional matured 2 day-cultured dendritic cells derived from human monocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tanaka F, Yamaguchi H, Haraguchi, N, Mashino K, Ohta M, Inoue H, Mori M
  • 雑誌名: Int J Oncol 29 ページ: 1263-1268
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Fatty acid binding protein 6 is overexpressed in colorectal cancer. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ohmachi T, Inoue H, Mimori K, Tanaka F, Sasaki A, Kanda T, Fujii H, Yanaga K, Mori M
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 12 ページ: 5090-5095
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] CEACAM6 gene expression in intrahepatic cholangiocarcinoma. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ieta K, Tanaka F, Utsunomiya T, Kuwano H, Mori M
  • 雑誌名: Br J Cancer 95 ページ: 532-540
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Reduced tau expression in gastric cancer can identify candidates for successful Paclitaxel treatment (2006)
  • 著者名/発表者名: Mimori K, Sadanaga N, Yoshikawa Y, Ishikawa K, Hashimoto M, Tanaka F, Sasaki A, Inoue H, Sugimachi
  • 雑誌名: Br J Cancer 94 ページ: 1894-1897
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Clinical significance of TROP2 expression in colorectal cancer. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ohmachi T, Tanaka F, Mimori K, Inoue H, Yanaga K, Mori M
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 12 ページ: 3057-3063
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Expression of the TRAG-3 gene in human esophageal cancer : the frequent synchronous expression of MAGE-3 gene. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ohta M, Tanaka F, Sadanaga N, Yamaguchi H, Inoue H, Mori M
  • 雑誌名: Oncol Rep 15 ページ: 1529-1532
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Differential gene expression profiles of radioresistant pancreatic cancer cell line (2006)
  • 著者名/発表者名: Ogawa K, Utsunomiya T, Mimori K, Tanaka F, Haraguchi N, Inoue H, Murayama S, Mori M
  • 雑誌名: Int J Oncol 28 ページ: 705-713
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Characterization of a side population of cancer cells from human gastrointestinal cancer (2006)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi N, Utsunomiya T, Inoue H, Tanaka F, Mimori K, Barnard GF, Mori M
  • 雑誌名: Stem Cells 24 ページ: 506-513
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Efficient induction of specific cytotoxic T lymphocytes to tumor rejection peptide using functional matured 2 day-cyltured dendritic cells derived from human monocytes. (2006)
  • 著者名/発表者名: Tanaka F, Yamaguchi H, Haraguchi N, Mashino K, Ohta M, Inoue H, Mori M
  • 雑誌名: Int J Oncol 29 ページ: 1263-1268
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Fatty acid binding protein 6, FABP6, is overexpressed in Colorectal cancer. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ohmachi T, Inoue H, Mimori K, Tanaka F, Sasaki A, Fujii H, Yanaga K, Mori M
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 12(17) ページ: 5090-5095
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Reduced tau expression in gastric cancer identify candidates for Successful Paclitaxel treatment. (2006)
  • 著者名/発表者名: Mimori K, Sadanaga N, Yoshikawa Y, Ishikawa K, Hashimoto M, Tanaka F, Sasaki A, Inoue H, Sugimachi K, Mori M
  • 雑誌名: Br J Cancer 94 ページ: 1894-1897
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Clinical Significance of TROP2 Expression in Colorectal Cancer. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ohmachi T, Tanaka F, Mimori K, Yanaga K, Mori M
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 12(10) ページ: 3057-3063
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Expression of the TRAG-3 gene in human esophageal cancer. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ohta M, Tanaka F, Sadanaga N, Yamaguchi H, Inoue H, Mori M
  • 雑誌名: Oncol Rep 15(6) ページ: 1529-1532
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Differential gene expression profiles of radioresistan pancreatic cancer cell lines established by fractionated irradiation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ogawa K, Utsunomiya T, Mimori K, Tanaka F. Haraguchi N, Inoue H, Murayama S, Mori M
  • 雑誌名: Int J Oncol 28 ページ: 705-713
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Characterization of a Side Population of Cancer Cells from Huma Gastrointestinal System. (2006)
  • 著者名/発表者名: Haraguchi N, Utsunomiya T, Inoue H, Tanaka F, Mimori K, Barnard, G.F., Mori M
  • 雑誌名: Stem Cells 24(3) ページ: 506-513
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より