| 研究課題/領域番号 |
17591738
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
稲垣 純子 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助手 (90271056)
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| 研究分担者 |
松浦 栄次 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教授 (20181688)
中塚 幹也 岡山大学, 医学部, 教授 (40273990)
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| キーワード | マウスラミニン-1 / 抗ラミニン-1抗体 / 子宮内膜症合併不妊症 / 糖鎖抗体 / 血管新生 |
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| 研究概要 |
1.子宮内膜症合併不妊症患者群に見られる抗マウスラミニン-1抗体のエピトープの解析を行ってきたが、本抗体の多くは、マウスラミニン-1のペプチド部分ではなく、N型糖鎖部分を認識していることが明らかになった。その一部は、α-Galエピトープ(Galα1-3Galβ1-4GlcNAc-R)と呼ばれる糖鎖構造を認識するα-Ga1抗体であったが、多くは、末端にα2-3結合シアル酸を含む糖鎖構造を認識する抗体であることが分かった。この抗体の真の抗原を特定するため、馬子宮内膜症腹膜病変や正所性子宮内膜、卵巣嚢胞等の組織、および腹水を用いて反応性のある物質の検出を試みたが、抗原と思われるものは検出できなかった。現在、患者血清が反応性を示すマウスラミニン-1の糖鎖部分の構造解析をHPLC/MSを用いて行っている。
2.近年樹立したIgMモノクローナル抗ラミニン-1抗体(AK8)、抗ラミニン-1抗体強陽性の患者血清から精製したIgGクラスの特異抗体、抗ラミニンポリクローナル抗体(市販品)を用い、ラミニン-1をコートしたプレートを用いたin vitro培養系で、マウス胚盤胞の発育(hatchingを含む)・接着・増殖伸長への影響を比較検討した。AK8および抗ラミニンポリクローナル抗体は、胚のhatchingには影響を与えなかったが、接着およびその後の増殖伸長を強く阻害した。しかし、患者血清から精製したラミニン-1の糖鎖に対する特異抗体は、胚のhatchingにも影響を与えなかったが、接着・増殖伸長の阻害も、約30%に留まった。
3.一部の患者に、γ1鎖のペプチド部分にも反応する抗体が存在することが明らかになった。そこで血管新生を促進することが知られているγ1鎖のN末端付近のペプチド配列(C16ペプチド)に対するモノクローナル抗体を作製した。この抗体は、HUVECのチューブ形成、およびヌードマウスを用いたin VIVOでの血管新生を抑制することが分かった。今後、子宮内膜症病変や正所性子宮内膜からの組織を用いて、血管新生や細胞の接着・浸潤・増殖への影響について解析する予定である。
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