| 研究課題/領域番号 |
17591755
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
大和田 倫孝 自治医科大学, 医学部, 助教授 (40203955)
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| 研究分担者 |
鈴木 光明 自治医科大学, 医学部, 教授 (50110870)
嵯峨 泰 自治医科大学, 医学部, 助手 (70360071)
小澤 敬也 自治医科大学, 医学部, 教授 (30137707)
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| キーワード | 卵巣癌 / 腹膜播種 / 分子標的治療 / 遺伝子治療 / アデノ随伴ウイルス / 基礎研究 |
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| 研究概要 |
卵巣癌において、腹膜播種形成には血管新生が重要な役割を果たしており、VEGF、bFGF、PDGF等の血管新生因子の関与が考えられる。血管新生抑制ならびに腹膜播種抑制因子としてsoluble Flt-1(sFlt-1)、interleukin-10(IL-10)、HGF/NK4を研究し、昨年度はこれら因子の発現ベクター(AAV-sFlt、AAV-IL-10、AAV-HGF/NK4)を作成した。さらにIL-10による卵巣癌腹膜播種モデルマウスでの血管新生抑制、腹膜播種抑制効果を確認した。
今年度は、臨床応用に向けてさらに基礎実験を施行し、以下の成果が得られた。
1)AAV-s Flt、AAV-IL-10の有害事象の検討
AAV-sFlt、AAV-IL-10をマウス後脚筋に筋注し、マウスの体重、血液・生化学検査の変化を検討した結果、体重の減少はみられず、また貧血、肝・腎障害などの異常所見はみられなかった。以上のことより、AAV-sFlt、AAV-IL-10は宿主に対して安全であることが確認された。
2)AAV-sFltの至適血清型の検討
各種血清型(I、II、V型)のAAV-sFltを作成し、骨格筋での発現をリアルタイムPCR法で、血中へのタンパク発現をELISA法で検討した。さらに治療効果を腹膜播腫動物実験モデルで検討した。その結果、骨格筋および血中での発現はI型が最も高いことが確認された。また、腹膜播腫抑制効果もI型が最も強いことが確認された。
3)AAV-sFltの至適投与部位の検討
最も発現の強いI型AAV-sFltを骨格筋と腹膜に投与し、投与部位での発現をリアルタイムPCR法で、血液中へのタンパク発現をELISA法で検討した。さらに治療効果を腹膜播腫動物実験モデルで検討した。その結果、骨格筋へ複数箇所投与することにより、最も高い発現が得られ、かつ腹膜播腫抑制効果が最も強いことが示された。
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