研究課題/領域番号 |
17591819
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研究種目 |
基盤研究(C)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
眼科学
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研究機関 | 山形大学 |
研究代表者 |
山下 英俊 山形大学, 医学部, 教授 (90158163)
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研究分担者 |
山本 禎子 山形大学, 医学部, 助教授 (00297706)
佐藤 浩章 山形大学, 医学部, 助手 (30344807)
柏木 佳子 山形大学, 医学部, 客員助手 (90375345)
佐藤 さくら 山形大学, 医学部, 医員 (60323169)
菅野 智華子 山形大学, 医学部, 医員 (90375337)
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研究期間 (年度) |
2005 – 2006
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キーワード | 糖尿病網膜症 / 網膜神経細胞 / 網膜血管 / 糖代謝異常 / 血管内皮増殖因子(VEGF) / 神経保護 / アクチピンA / アポトーシス |
研究概要 |
糖尿病網膜症治療のターゲットを失明、視力低下抑制からよりよい視力を確保へとシフトするには高血糖状態で有効に糖尿病初期からの網膜神経保護が需要である。 (1)網膜神経細胞の糖尿病における病態モデルと神経障害分子メカニズム:網膜由来細胞株として網膜芽細胞腫株(RB株)を検討に用い、高血糖刺激、酸化ストレス(過酸化水素刺激)による病態検討を行った。1)非高血糖群、2)高血糖群、3)非高血糖+過酸化水素群、4)高血糖+過酸化水素群の4群に分け、ジアシルグリセロールキナーゼ(以下DGK)の発現を検討した。プロテインキナーゼC(以下PKC)、VEGFの変化も検討した。RB株で高血糖によりDGK酵素活性が上昇し、DGKαの発現が高血糖によって誘導され、mRNAレベルでのDGKαの発現パターンはVEGFの発現と一致していた。DGK酵素活性はPKCのtranslocationに影響はなかった。高血糖刺激によりDGK酵素活性が上昇し、DG産生を低下させていると考えられるが、PKCの活性に影響はなく、むしろDGKαは網膜細胞において、高血糖刺激によるVEGF誘導に関与している可能性があると考えられた。ストレプトゾトシン投与高血糖モデルラットの網膜における発現を見たところ、高血糖状態で、網膜における発現が平行して上昇するのがみられた。 (2)血管病変のトランスヂューサー:ブタ由来硝子体細胞をもちいた実験で炎症性サイトカインの作用で血管への直接作用のあるVEGF,IL-6が誘導され、これにより網膜血管細胞が障害される病態が考えられる。 (3)網膜神経細胞のアポトーシスの分子メカニズム:糖尿病網膜病の硝子体内で発現が誘導されるアクチビンAによりRB株のアポトーシスが誘導されることを細胞レベルで検討した。RBにはアクチビン受容体が発現しており、シグナルが伝達される。アクチビンの作用によりアポトーシスが誘導されることを確認した。(3)網膜神経細胞のアポトーシスの分子メカニズム:糖尿病網膜病の硝子体内で発現が誘導されるアクチビンAによりRB株のアポトーシスが誘導されることを細胞レベルで検討した。RBにはアクチビン受容体が発現しており、シグナルが伝達される。アクチビンの作用によりアポトーシスが誘導されることを確認した。 今回の研究により高血糖状態の網膜細胞においてDGKαおよびPKC-βの下流にVEGFの発現上昇が誘導されること、糖尿病状態で眼内サイトカインにより網膜神経細胞のアポトーシスが誘導されることが解明され、これをターゲットとして新しい治療法開発を行う意義が示された。
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