| 研究概要 |
本研究は、ヒト同一歯に由来する歯根膜線維芽細胞と歯肉線維芽細胞の培養形系を用いて、トロポエラスチン、微細線維、エラスチン結合タンパク質の発現とその遺伝子発現、ならびにエラスチン沈着量を経時的に分子生物学的、免疫細胞組織化学的に解析した。これらより、エラスチン沈着機構の解明を試みた。
弾性系線維形成においては,トロポエラスチンの微細線維への沈着機構が必要とされている。そこで、微細線維結合性糖タンパク質(MAGP-1)、微細線維フィブリリン(fibrillin-2)とエラスチン結合タンパク(fibulin-5)遺伝子をRNA干渉法(RNAi)でノックダウンして、トロポエラスチン沈着の変化を解析した。
MAGP-1とfiburillin-2の遺伝子をRNAiでノックダウンすると、トロポエラスチンの沈着が対照群の30%以下に抑制された。免疫組織化学的にも同様な抑制が観察された。少なくとも、MAGP-1とfibrillin-2はトロポエラスチン沈着を直接あるいは間接的に制御していることを明らかにした。次に,fibulin-5の発現とその遺伝子発現を解析した。歯肉線維芽細胞では,fibulin-5とトロポエラスチンの遺伝子発現は経時的に上昇する類似した発現パターンを示した。さらに,歯肉線維芽細胞では,RNAiを用いてトロポエラスチン発現を抑制すると,fibulin-5の発現も抑制された。fibulin-5遺伝子発現はトロポエラスチン遺伝子発現で調節されていることが示唆された。しかし,歯根膜線維芽細胞では,fibulin-5の弱い発現は認められたが,発現パターンの変化は認められなかった。
|
