| 研究課題/領域番号 |
17591955
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| 研究機関 | 松本歯科大学 |
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研究代表者 |
山下 照仁 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 講師 (90302893)
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| 研究分担者 |
宇田川 信之 松本歯科大学, 歯学部, 教授 (70245801)
二宮 禎 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 助手 (00360222)
中道 裕子 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 助手 (20350829)
溝口 利英 松本歯科大学, 総合歯科医学研究所, 講師 (90329475)
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| キーワード | 破骨細胞 / MAPキナーゼ / 骨吸収 / 延命 / 酵母ツーハイブリッド |
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| 研究概要 |
1.恒常的活性型MKK6の導入によるp38 MAPキナーゼ経路の制御
恒常的活性型およびドミナントネガティブ型のMKK6を破骨細胞に導入することにより、p38 MAPキナーゼの活性を制御して、破骨細胞の骨吸収機能と生存に対する影響を明らかにした。恒常的活性型MKK6は象牙切片上の骨吸収に対して影響しなかった。一方、破骨細胞の24時間および48時間生存率に対して、恒常的活性型MKK6によるのp38 MAPキナーゼ活性化は、顕著な生存率の向上を示した。この破骨細胞の生存はp38 MAPキナーゼ特異的阻害薬であるSB203580の添加によって阻害された。ドミナントネガティブ型のMKK6は、骨吸収および生存に対して影響を与えなかった。
2.病態モデル動物におけるp38 MAPキナーゼ活性化の解析
骨破壊の亢進している病態モデルとして、コラーゲン誘導性のリウマチ動物モデルとOPGノックアウトマウスを用いた。これらの病態モデルマウスの骨組織の中で、p38 MAPキナーゼの活性化が破骨細胞で誘導されているのか否かを、組織学的解析法を用いて明らかにした。OPGノックアウトマウスの骨髄骨ではリン酸化p38 MAPキナーゼ陽性を示す細胞が野生型マウスに較べて顕著に多くなっていた。一方、コラーゲン誘導性の骨破壊マウスでは、リン酸化p38 MAPキナーゼ陽性細胞は検出されなかった。
3.p38 MAPキナーゼ経路のシャットダウン機構因子の検索
破骨細胞のp38 MAPキナーゼはサイトカイン刺激によって活性化されない。また、上流のキナーゼMKK6もリン酸化されてなかった。そこで、上流のMKK6に対する不活化機構を予想し、MKK6と結合する阻害因子を酵母Two hybrid法で探索した。本研究期間に、MKK6結合因子の候補をいくつか単離することに成功した。
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