| 研究課題/領域番号 |
17591985
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
佐藤 拓一 東北大学, 大学院・歯学研究科, 講師 (10303132)
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| 研究分担者 |
島内 英俊 東北大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (70187425)
高橋 信博 東北大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (60183852)
八巻 惠子 東北大学, 大学院・歯学研究科, 助教 (90182419)
松山 順子 新潟大学, 医歯学系, 助教 (30293236)
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| キーワード | 歯学 / 口腔細菌 / 根尖性歯周炎 / PCR / 16S ribosomal RNA |
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| 研究概要 |
歯内疾患・感染根管内に棲息する微生物の種類と量に注目し、根尖性歯周炎の治療経過に伴う感染根管内細菌叢の質及び量的動態を明らかにすることを目的とした。本研究では、リアルタイムPCR法を用いて根管治療開始時と根管充填直前の根管内総細菌量を定量解析し、さらに16S ribosomal RNA genesのクローニング法とシークエンス法を用いて、根管内細菌叢の構成細菌種の変化についても比較・検討した。本学歯内療法科を受診した患者で、インフオームド・コンセントの得られた根尖性歯周炎症例を研究対象とした。感染象牙質の採取は、感染根管治療開始時と根管充填直前、すなわち、根管内惨出液が認められず、根尖部の炎症が改善したと臨床的に考えられる時点の計2回行った。各試料の象牙質中のジェノミックDNAを抽出し、16S ribosomal RNA遺伝子ユニバーサルプライマーを用いたリアルタイムPCRによって、総細菌量を求めた。また、増幅させた16S ribosomal RNA遺伝子からクローニング法によって感染根管内細菌叢を構成する細菌種を同定した。さらに、同定した細菌種の系統樹を作成し各細菌種の類縁関係を検討した。根管充填直前の象牙質中の細菌量は、根管治療開始時よりも、明らかに低かった。系統樹による類縁関係の解析の結果、根管治療開始時において、Fusobacteriumなどのグラム陰性の口腔細菌種が優勢であったが、根管充填直前においては、口腔からの検出が稀な菌種(Pseudomonas,Bradyrhizobium,Methylobacterium)が優勢であることが判明した。
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