| 研究課題/領域番号 |
17591985
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
保存治療系歯学
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| 研究機関 | 東北大学 |
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研究代表者 |
佐藤 拓一 東北大学, 大学院・歯学研究科, 講師 (10303132)
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| 研究分担者 |
島内 英俊 東北大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (70187425)
高橋 信博 東北大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (60183852)
八巻 恵子 東北大学, 大学院・歯学研究科, 助教 (90182419)
松山 順子 新潟大学, 医歯学系, 助教 (30293236)
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| 研究期間 (年度) |
2005 – 2007
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| キーワード | 歯学 / 口腔細菌 / 根尖性歯周炎 / PCR / 16S ribosomal RNA |
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| 研究概要 |
歯内疾患・感染根管内に棲息し、病原性に関与するとされる微生物叢に注目し、根尖性歯周炎の治療経過に伴う感染根管内細菌叢の質及び量的動態を明らかにすることを目的とした。本研究では、real-time PCR法を用いて根管治療開始時と根管充填前の根管内総細菌DNA量を定量解析し、さらに16S ribosomal RNA genesのPCR-cloning法とPCR-sequence法を用いて、根管内細菌叢の構成細菌種の変化について検討した。本学歯科医療センター歯内療法科を受診した患者で、インフォームド・コンセントの得られた根尖性歯周炎症例を研究対象とした。感染象牙質の採取は、感染根管治療開始時と根管充填前、すなわち、根管内滲出液が認められず、根尖部の炎症が改善したと臨床的に判断される時点の計2回行った。各試料の象牙質からgenomic DNAを抽出し、細菌特有の16S ribosomal RNA genes universal primersを用いたreal-time PCRによって、総細菌DNA量を求めた。また、増幅させた16S ribosomal RNA genesからPCR-cloning法によって感染根管内細菌叢を構成する細菌種を求めた。さらに、その細菌種の系統樹を作成し各細菌種間の類縁関係を検討した。根管充填前の象牙質中の細菌DNA量は、根管治療開始時よりも、明らかに低かった。系統樹による類縁関係の詳細な解析の結果、根管治療開始時において、グラム陰性偏性嫌気性の口腔細菌種(Fusobacteriumなど)が優勢であったが、根管充填前においては、口腔からの検出が稀な菌種(Pseudomonas, Bradyrhizobium, Methylobacterium)が優勢であり、根管治療開始時と根管充填前では、根管内細菌叢は系統的に異なった細菌種から構成されていることが判明した。
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