|
デキサメタゾン、アスコルビン酸-2リン酸そしてβ-グリセロフォスフェイトをMEM培地に添加して骨髄幹細胞を培養し、培養器内に石灰化物を形成させることはヒトとラットで行われており、本試験でもラット骨髄幹細胞で石灰化物を形成させることができた。歯髄由来細胞には極めて少数ではあるが自律性に硬組織を形成する細胞が存在することが確認された一方で、歯髄由来細胞には付着性の細胞が少なく、歯髄由来細胞の初代培養が困難であり、立体培養の応用が適当と考えられる結果が得られた。そこで、骨髄幹細胞あるいは歯髄由来細胞を骨芽細胞あるいは象牙芽細胞のような硬組織形成能を有する細胞に分化させて歯髄・象牙質複合体から歯根再生を目指すために、多孔質ハイドロキシアパタイト担体の応用を試行した。骨髄幹細胞あるいは歯髄由来細胞を気孔中に含む多孔質ハイドロキシアパタイト担体をラット背部皮下組織内に埋入し、その気孔内での硬組織形成細胞への分化と硬組織形成を試みた。
本研究においては、少数の幹細胞が効果的に骨芽細胞に分化して多孔質担体の気孔に骨が形成されるように、幹細胞の増殖あるいは分化の補助因子を検討した。当初の段階として、気孔内壁への幹細胞の接着を考え、ラミニンを用いた。すなわち、多孔質ハイドロキシアパタイト担体をラミニン溶液に浸漬したあと、初代培養を行ったラット大腿骨骨髄細胞をその担体に播種して同種ラット背部皮下に埋入して気孔内への骨形成を図った。一般に、この実験では1×10^7個/mLの濃度の細胞浮遊液を調製して担体に播種する必要があるが、ラミニンを応用した担体では1/10濃度の細胞浮遊液を播種することによって骨が形成され、ラミニンが骨形成の有効な補助剤である結果を得た。
この結果は学会発表および学会誌への投稿によって公表した。
|
