研究概要 |
in situ hydridizationのため,4%paraformaldehyde溶液中に浸漬後,マイクロウェーブ処理を加えて固定した.in situ hydridization結果:4週齢・40週齢ラットとも正常骨膜では,血管周囲に存在する紡錘形細胞にBMP receptor mRNAが発現していた.前骨芽細胞や骨芽細胞にオステオポンチンmRNAが発現していた.骨芽細胞と骨細胞にオステオカルシンmRNAのシグナルを認めた.40週齢ラット剥離後は骨膜構造が極めて不明瞭になり,小血管周囲に存在する紡錘形細胞にBMP receptor mRNAが発現していた.オステオポンチンmRNAは紡錘形細胞や前骨芽細胞に発現していたが,経時的に骨膜の再生が進むと前骨芽細胞や骨芽細胞に発現の増強がみられた.石灰化を開始した部位の骨芽細胞と骨細胞にオステオカルシンmRNAのシグナルを初めて認めた. ラットからRNA用組織として正常骨膜と剥離復位骨膜をサンプリングし,液体窒素で急速凍結後-80℃で保存した.剥離復位骨膜の遺伝子発現は,正常骨膜に比較して特にオステオポンチンmRNAの増強が著明であった.オステオカルシンmRNAは,剥離後骨膜では不明瞭であった.
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