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本研究では、歯肉線維芽細胞におけるサイトカインによるプロスタグランジンE2産生メカニズムについて、細胞内伝達情報経路のなかで重要な役割を占めるカルシニューリンの影響について、免疫抑制剤であるサイクロスポリンAやFK506を用いて検討を行った。
1.プロスタグランジンE_2産生
歯肉線維芽細胞にサイクロスポリンAを作用させプロスタグランジンE_2量をELISA法により測定した。サイクロスポリンAは単独で濃度依存的および経時的にプロスタグランジンE_2を産生した。IL-1βによるプロスタグランジンE_2産生に対してやや増強する傾向が認められた。FK-506を用いてサイクロスポリンAと同様の効果を検討した結果、FK-506はIL-1βによるプロスタグランジンE_2産生を増強した。
2.IL-1βによるによるプライミグにおよぼす効果
IL-1βを長時間作用させた後、ブラジキニンを作用させると多量のプロスタグランジンE_2が産生されるが、ここで同時にサイクロスポリンAとFK-506を作用するとプライミング効果はさらに増強された。
3.シクロオキシゲナーゼー-2mRNA発現
プロスタグランジンE_2産生酵素であるシクロオキシゲナーゼー-2mRNA発現をRT-PCR法により測定した。サイクロスポリンAではシクロオキシゲナーゼー-2mRNA発現が認められ、IL-1βによる発現に対しては増強傾向を示した。さらに詳細な検討を行うため、リアルタイムRT-PCR法による検討を行った。サイクロスポリンA単独でIL-1βと比較すると弱いながらも用量に依存したシクロオキシゲナーゼー-2mRNA発現が認められた。またIL-1βとサイクロスポリンAを組み合わせることにより、若干のシクロオキシゲナーゼー-2mRNAの発現が上昇が認められた。
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