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2007 年度 実績報告書

超好熱菌由来の高度耐熱性アルドラーゼの機能開発

研究課題

研究課題/領域番号 17613002
研究機関徳島大学

研究代表者

櫻庭 春彦  徳島大学, 大学院・ソシオテクノサイエンス研究部, 准教授 (90205823)

研究分担者 大島 敏久  九州大学, 大学院・農学研究院, 教授 (10093345)
キーワード酵素反応 / 遺伝子 / バイオテクノロジー / 微生物 / 酵素工学 / X線結晶構造解析 / 超好熱菌 / 耐熱性酵素
研究概要

我々は、超好熱菌で初めて2-デオキシリボース-5-リン酸アルドラーゼ(DERA)を見出し、有用性が非常に期待できる安定性の高い酵素であることを明らかにしている。超好熱菌由来の酵素であるにもかかわらず、25℃のような低温条件で、産業利用に有用な3分子のアセトアルデヒド縮合反応を触媒することを明らかにした。産物は、高コレステロール血症治療薬のビルディングブロックとして利用できる。超好熱菌由来DERAによるこの物質の生産性は、同じ条件下において大腸菌DERAと比較しても非常に高いことが明らかとなった。また、環境試料中から直接DNAを抽出し、DERA遺伝子保存領域を用いた縮重PCR法によりDERA遺伝子の部分配列を獲得することに成功している。超好熱菌Thermotoga maritima由来のDERAとこの配列をスワップさせ、ミュータントを作製し、産物であるキメラ酵素がDERA活性を示すことを見出した。これにより、微生物を培養することなく、直接現境中のDERA遺伝子部分配列を取得することが可能となった。さらに、好酸性好熱菌Sulfolobus tokodaiiに見出した2種類のKDGアルドラーゼが、高い安定性を持つこと、また、本来の基質であるグルコン酸以外にも作用し、広い基質特異性を持つことを明らかにしてきた。この内一つの酵素のX線構造解析に成功した。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2008 2007

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Structure of L-aspartate oxidase from the hyperthermophilicarchaeon Sulfolobus tokodaii2008

    • 著者名/発表者名
      Sakuraba H., et. al.
    • 雑誌名

      Biochim Biophys Acta 1784

      ページ: 563-571

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Sequential aldol condensation catalyzed by hyperthermophilic 2-deoxy-D-ribose-5-phosphate aldolase2007

    • 著者名/発表者名
      Sakuraba H., et. al.
    • 雑誌名

      Applie and Environmental Microbiology 73

      ページ: 7427-7434

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Gene expression and characterization of 2-keto-3-deoxygluconate kinase,a key enzyme in the modified Entner-Doudoroff pathway of the aerobic and acidphilic hyperthermop hile Sulfolobus tokodaii.2007

    • 著者名/発表者名
      Ohshima T., et. al.
    • 雑誌名

      Protein Expression and Purification 54

      ページ: 73-78

    • 査読あり
  • [学会発表] 超好熱菌由来アルドラーゼの結晶構造解析2007

    • 著者名/発表者名
      櫻庭 春彦
    • 学会等名
      第59回日本生物工学会大会(シンポジウム)
    • 発表場所
      広島大学東広島キャンパス
    • 年月日
      2007-09-26
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より

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公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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