| 研究概要 |
本研究では、メタロチオネイン遺伝子を用いて、毒素生産に不可欠な微量要素を細胞外でトラップして宿主から菌に供給できなくすることにより、病原菌による毒素生産が抑制され、ACR毒素生産菌に対する耐病性が増強できると考えている。
研究代表者担当 Alternaria alternata rough lemon pathotypeは,宿主特異的ACR毒素を生産し,カンキツの重要病害の一つであるAlternaria leaf spot病を引き起こす.ACR毒素の生産には亜鉛が必須であることがこれまでに報告されている。そこで今年度は,A. alternata rough lemon pathotype HC1株でRlemMT1を過剰発現させた.これにより,RlemMT1を細胞外に分泌させることで菌細胞への亜鉛供給を減少させ,ACR毒素の生産を抑制できると考えた.サザンブロットによりRlemMT1の挿入が確認されたOEMT16株において,RlemMT1の転写量をノーザンブロットで検証したところ,形質転換体においては野生株にはみられないRlemMT1の転写が確認された.また,これらの形質転換体においては,ACR毒素生産量の減少が認められた.
研究分担者担当 イチゴメタロチオネイン遺伝子部分配列をもとに,レース法を用いたcDNAの単離と、その配列に相当するゲノム遺伝子のクローニングを進めた。その結果、2つのイチゴメタロチオネイン遺伝子cDNA全長を単離し、その中の1つはRlemMT1タイプで、もう一つは異なるタイプのメタロチオネインであることが明らかとなった。
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