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2006 年度 実績報告書

遺伝学を用いたセントロメアおよびヘテロクロマチン構造の形成機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 17687002
研究機関国立遺伝学研究所

研究代表者

深川 竜郎  国立遺伝学研究所, 分子遺伝研究系, 助教授 (60321600)

キーワードセントロメア / DT40細胞 / 染色体分配 / キネトコア / RNAiマシーナリー / CENPs / プロテオミクス / 細胞分裂
研究概要

染色体複製・分配のような基本的な生体反応に狂いが生じると染色体の異数化、がん化など細胞に対する悪影響が生じる。したがって、染色体複製や分配の正確な分子機構を解明することは、遺伝学における本質的な課題の一つである。本研究では、主にプロテオミクスを用いて新規セントロメアタンパク質を同定してセントロメアを構成する巨大複合体の実体を知ることを目的としている。また、同時にセントロメアやその近傍のヘテロクロマチンの形成に必要な分子機構の解明を試みといる。昨年度までの研究で、ヒトおよびニワトリ細胞からセントロメアタンパク質CENP-HおよびCENP-Iと強く相互作用する9種類のタンパク質を同定した。18年度は、昨年度までの実験を繰り返し、さらなるタンパク質の同定を進め、CENT-H/I複合体には昨年同定したタンパク質を含め少なくも13種類のタンパク質を含むことが明らかにできた。CENP-H/I複合体を構成するタンパク質のノックアウト細胞を複数作成し、それらが正常な染色体分配とキネトコア形成に必須な役割を担っていることが明らかになった。さらに、CENP-H/I複合体が、新しく合成されたCENP-Aの取り込みに重要な働きを担うことを示すことができた。また、セントロメアやその近傍のヘテロクロマチンの重要な働きを担う可能性がAgo3遺伝子のノックアウト細胞を作成し、ノックアウト細胞において、ヘテロクロマチン形成の必要と思われる遺伝子の発現が低下していることを明らかにできた。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2007 2006

すべて 雑誌論文 (6件) (うち査読あり 1件)

  • [雑誌論文] Essential Role of CAF-1-mediated Rapid Nucleosome Assembly for DNA Replication and Cell Division in Vertebrate Cells.2007

    • 著者名/発表者名
      Yasunari Takami
    • 雑誌名

      Molecular Biology of the Cell 18

      ページ: 129-141

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Purification of a protein complex that associates with chromatin.2006

    • 著者名/発表者名
      Masahiro Okada
    • 雑誌名

      Nature Protocols DOI:10.1038/nprot.2006

  • [雑誌論文] A novel histone-exchange factor, protein phosphatase 2Cγ, mediates the exchange and dephosphorylation of H2A/H2B.2006

    • 著者名/発表者名
      Hiroshi Kimura
    • 雑誌名

      Journal of Cell Biology 175

      ページ: 389-400

  • [雑誌論文] The CENP-H-I complex is required for the efficient incorporation of newly synthesized CENP-A into centromeres.2006

    • 著者名/発表者名
      Masahiro Okada
    • 雑誌名

      Nature Cell Biology 8

      ページ: 446-457

  • [雑誌論文] The Human Mis12 Complex is Required for Kinetochore Assembly and Proper Chromosome Segregation.2006

    • 著者名/発表者名
      Susan Kline
    • 雑誌名

      Journal of Cell Biology 173

      ページ: 9-17

  • [雑誌論文] Asf1 is required for viability and chromatin assembly during DNA replication in vertebrate cells.2006

    • 著者名/発表者名
      Fumiyuki Sanematsu
    • 雑誌名

      Journal of Biological Chemistry 281

      ページ: 13817-13827

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公開日: 2008-05-08   更新日: 2016-04-21  

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