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2006 年度 実績報告書

ギラン・バレー症候群由来のモノクローナル抗ガングリオシド抗体の作成と遺伝子解析

研究課題

研究課題/領域番号 17689028
研究機関獨協医科大学

研究代表者

小鷹 昌明  獨協医科大学, 医学部, 講師 (50322409)

キーワードギラン・バレー症候群 / 抗ガングリオシド抗体 / モノクローナル抗体
研究概要

Campylobacter jejuiリポオリゴ糖はヒト末梢神経GM1ガングリオシドと分子相同性を有し、IgG抗GM1抗体価が急性期のギラン・バレー症候群(GBS)患者血中に上昇する。軸索型GBSでは、抗GM1抗体だけでなく、IgG抗GM1b、抗GD1a、抗Ga1NAc-GD1a抗体が単独もしくは組み合わせで検出される。自己抗体は、高い親和性を獲得して病原性を発揮する。その分子基盤は、免疫グロブリン遺伝子の変異頻度が高いことにある。GBSとその亜型患者由来のモノクローナル抗ガングリオシド抗体を得て、その親和性を測定し、免疫グロブリン遺伝子の塩基配列を決定する。得られたモノクローナル抗体を用いて、標的分子(GM1、GM1b、GD1a、Ga1NAc-GD1a、GQ1b、GT1a)のヒト神経系における発現部位、細胞内局在をマッピングする。現在モノクローナル抗ガングリオシド抗体を精力的に作成している。
ガングリオシドとアフィニティーが強く、pathogenicな抗ガングリオシドIgG抗体を産生するB細胞クローンを単離する。インフォームドコンセントの得られた、ギラン・バレー症候群患者の末梢血B細胞からRNAを単離し、cDNAを合成する。そのcDNAをpFABsG3-sacBベクター(scFv :イムノグロブリン可変部鎖域)に組み込み、PCRにてイムノグロブリンheavy chainおよびlight chain遺伝子を増幅する。次いで、シャペロンベクターpCDFDuet-1-Smに移し、大腸菌TOP10F'にトランスフォーメーションする。インサートを有する大腸菌をアンピシリン寒天培地上で選択しする。それをさらに大腸菌XL-1 Blueにトランスフォーメーションし、ファージコートタンパクとscFvの融合タンパクを表面に発現したファージを産生させる。ガングリオシドGM1、GDla、GQlbを因相化したファルコンボトルにファージ(大腸菌の培養上清)入れ、八二ングにてガングリオシドと親和性のあるファージをスクリーニングする。現在、DNAの合成中である。

  • 研究成果

    (6件)

すべて 2007 2006

すべて 雑誌論文 (6件)

  • [雑誌論文] Treatment response to steroid and intravenous immunoglobulin in a patient with chronic sensory demyelinating neuropathy.2007

    • 著者名/発表者名
      Odaka M, Ito M, Hirata K, Yuki N
    • 雑誌名

      J Clin Neuromusc Dis

  • [雑誌論文] Treatment for Fisher syndrome, Bickerstaffs brainstem encephalitis and related disorders.2007

    • 著者名/発表者名
      Overell JR, Hsieh ST, Odaka M, Yuki N, Willison HJ
    • 雑誌名

      Cochrane Database Syst Rev CD004761

  • [雑誌論文] Relationship of bacterial strains to clinical syndromes of Campylobacter associated neuropathies.2006

    • 著者名/発表者名
      Kimoto K, Koga M, Odaka M, Hirata K, Takahashi M, Li J, Gilbert M, Yuki N
    • 雑誌名

      Neurology 67

      ページ: 1837-1843

  • [雑誌論文] Spectrum of neurological diseases associated with antibodies to minor gangliosides GM1b and GalNAc-GD1a.2006

    • 著者名/発表者名
      Tatsumoto M, Koga M, Gilbert M, Odaka M, Hirata K, Kuwabara S, Yuki N
    • 雑誌名

      J Neuroimmunol 177

      ページ: 201-208

  • [雑誌論文] Isolated abducens nerve palsy as a regional variant of Guillain-Barre syndrome.2006

    • 著者名/発表者名
      Tatsumoto M, Odaka M, Hirata K, Yuki N
    • 雑誌名

      J Neurol Sci 243

      ページ: 35-38

  • [雑誌論文] Current management of chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy : a treatment protocol proposal.2006

    • 著者名/発表者名
      Odaka M.
    • 雑誌名

      Expert Rev Neurother 6

      ページ: 365-379

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公開日: 2008-05-08   更新日: 2016-04-21  

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