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種々の悪性腫瘍において、単一の癌遺伝子を標的にするのみで、分化誘導あるいはアポトーシス誘導による腫瘍の縮小や治癒が観察され、癌遺伝子への依存が癌のアキレス腱となることが示されている。本研究では口腔癌の増殖、浸潤、転移において重要な役割を担っている癌遺伝子を同定し、その癌遺伝子を標的とした治療ツールの開発を試みた。まず、ヒト全遺伝子型マイクロアレイ解析より、正常口腔粘膜組織(3症例)および不死化ヒト角化上皮細胞(1株)において全く発現が認められず、口腔癌組織(10症例)と培養ヒト口腔癌細胞(10株)おいてのみ共通して発現が認められる遺伝子を2種類同定した。一つは既知の癌遺伝子であるAkt1で、もう一つはRNA編集に関与する遺伝子であった。つづいて、口腔癌組織63症例を用いてAkt1の発現を免疫組織化学染色にて評価したところ、94%の症例においてその発現が確認された。また、正常口腔粘膜上皮組織を用いて同様の検討を行ったが、Akt1の発現は検出されなかった。次に、Akt1に対する合成small interfering RNA(siRNA)を10種類設計、作製したのちに、口腔癌細胞株にリポフェクション法にて導入し、Western blotting法にて個々のsiRNAのRNA interference(RNAi)効果を評価した。3種類の合成siRNAが顕著なRNAi効果を示したため、同siRNAを用いて口腔癌細胞の浸潤増殖におけるAkt1の機能を評価した。3種類全ての合成siRNAは口腔癌細胞の浸潤増殖を著明に抑制した。さらに、口腔癌細胞をヌードマウス背部皮下に移植し、腫瘍形成を確認したのちに、Akt1に対する合成siRNAをアテロコラーゲンと共に腫瘍周囲に投与したところ、腫瘍の増殖を顕著に抑制した。Akt1に対する合成siRNAはin vitroおよびin vivoにおいて口腔癌細胞に対して明らかな抗腫瘍効果を示した。以上の結果より、Akt1は口腔癌の浸潤増殖を支持する重要な癌遺伝子の一つであることが示唆された。
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