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研究代表者らが過去に単離したヒトfibroblast growth factor receptor 2(FGFR2)IIIc、FGFR2IIIcS252Wおよび可溶型FGFR2IIIcS252W(sFGFR2IIIcS252W)をadeno-associated virus vector(pAAV MCS vector ; AAV-Heper Free System ; Stratagene)のBamHI/XhoI制限酵素サイトに組み込み、発現ベクターを構築した。また、FGFR2IIIcのisomerで、上皮系の細胞に重要な働きを担うFGFR2IIIbおよびFGFR2IIIbS252Wについても同様に発現ベクターを構築した。構築した各発現ベクターをCOS-1細胞に一過性にトランスフェクションし、目的蛋白質の発現を、抗FGFR2抗体を用いたWesternblot法にて確認した。現在、ヒト胎児腎由来293細胞にpAAV-RC vector(rep/cap遺伝子搭載)、pHelper vector、(E2A、E4、VARNAs搭載)と共にリン酸カルシウム法にてco-transfectionし、ベクター精製を行っている。今後は、精製したベクターの力価をドットブロット法にて検索した後、in vivoにてその効果を検索する予定である。
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