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2019 年度 実績報告書

食品タンパク質由来の脂質代謝改善ペプチドに関する基盤的研究

研究課題

研究課題/領域番号 17H00817
研究機関岐阜大学

研究代表者

長岡 利  岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (50202221)

研究分担者 松井 利郎  九州大学, 農学研究院, 教授 (20238942)
上野 義仁  岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (20250467)
本多 裕之  名古屋大学, 予防早期医療創成センター, 教授 (70209328)
伊藤 弘康  岐阜大学, 大学院医学系研究科, 准教授 (80373075)
研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2020-03-31
キーワードラクトスタチン / IIAEK / FP / ペプチド / コレステロール / 大豆β-コングリシニン / Caco-2 / ラット
研究実績の概要

[研究目的・方法] (実験1)長岡らが発見したラクトスタチン(IIAEK)の媒介する新規肝臓コレステロール(CHOL)分解調節系や新規腸CHOL吸収調節系に関与する、ラクトスタチン受容体(仮説)の特定を含めた標的分子を解明する。ラクトスタチンの媒介する新規腸CHOL吸収調節系に関与するラクトスタチン受容体特定を含めた標的分子を解明(蛍光標識ラクトスタチン合成)する。そのため、ヒト腸培養細胞Caco-2やラットの細胞膜を超遠心などにより精密単離し、細胞膜画分と蛍光標識ラクトスタチンとの相互作用を解析する。(実験2)ラットで血中に出現する大豆タンパク質由来ペプチドを特定し、革新的脂質代謝改善ペプチド発見を目指す。脂質代謝改善作用を発揮する大豆β-コングリシニン(大豆β)をラットに経口投与し、投与後に血中に出現する大豆β由来ペプチドをTOF/MSなどで特定する。(実験3)牛心臓加水分解物から種々の手法で新規CHOL代謝改善ペプチドを特定する。
[結果](実験1)ラット小腸粘膜画分やCaco-2細胞から脂質ラフトを単離して、蛍光標識ラクトスタチン(IIXEK)を用いて光親和性標識実験(MS解析含む)から脂質代謝改善に寄与するアルカリフォスファターゼ(IAP)が検出した。(2)Caco-2細胞へのIIAEK添加により、IAP mRNAやタンパク質レベルは有意に増加した。IIAEKはIAPの特異的活性化を介して、腸CHOL代謝改善遺伝子(ABCA1)に影響することを発見した。(実験2)化学合成ペプチドを用いてLCMSのRetention Timeの比較を行った結果、ラット全身血血漿中に、3~8残基の大豆β由来の合計9個のペプチドを検出した。(実験3)世界で最初に400種のジペプチドから新規コレステロール代謝改善ジペプチドFP(フェニルアラニン-プロリン)を発見した。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (15件)

すべて 2020 2019

すべて 雑誌論文 (4件) (うち査読あり 4件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (10件) (うち国際学会 1件、 招待講演 5件) 産業財産権 (1件)

  • [雑誌論文] Molecular mechanism by which tea catechins decrease the micellar solubility of cholesterol.2019

    • 著者名/発表者名
      Sakakibara, T., Sawada, Y., Wang, J., Nagaoka, S., Yanase, E.
    • 雑誌名

      J. Agric. Food Chem.

      巻: 67 ページ: 7128-7135

    • DOI

      10.1021/acs.jafc.9b02265

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Identification of a novel cholesterol-lowering dipeptide, phenylalanine-proline (FP), and its down-regulation of intestinal ABCA1 in hypercholesterolemic rats and Caco-2 cells.2019

    • 著者名/発表者名
      Banno, A., Wang, J., Okada, K., Mori, R., Mijiti, M., Nagaoka, S.
    • 雑誌名

      Sci. Rep.

      巻: 9 ページ: 19416

    • DOI

      10.1038/s41598-019-56031-8

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Epigallocatechin gallate induces up-regulation of LDL receptor via the 67 kDa laminin receptor-independent pathway in HepG2 cells.2019

    • 著者名/発表者名
      Zanka K., Kawaguchi Y, Okada Y, Nagaoka, S.
    • 雑誌名

      Mol. Nutr. Food Res.

      巻: e1901036 ページ: 該当無し

    • DOI

      10.1002/mnfr.201901036

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 大豆タンパク質・ペプチドの栄養と機能, 脂質代謝改善機能を中心に.2019

    • 著者名/発表者名
      長岡 利
    • 雑誌名

      アミノ酸研究

      巻: 13 ページ: 5-10

    • 査読あり
  • [学会発表] ジペプチドFP(Phe-Pro)は肥満と高コレステロール血症を改善する新規ペプチド である.2019

    • 著者名/発表者名
      坂野 新太、森 崚輔、岡田 健司、王 吉力特、山本 雄太、二本 松太郎、長岡 利
    • 学会等名
      第76回日本栄養食糧学会中部支部大会(静岡)
  • [学会発表] 新規コレステロール代謝改善ジペプチドFP(Phe-Pro)の発見と作用機構解析2019

    • 著者名/発表者名
      坂野 新太、岡田 健司、王 吉力特、二本松太郎、山本雄太、長岡 利
    • 学会等名
      第73回日本栄養食糧学会(静岡)
  • [学会発表] 新規抗肥満・抗高コレステロール血症ジペプチドFP(Phe-Pro)の発見2019

    • 著者名/発表者名
      坂野 新太、森 崚輔、岡田 健司、王 吉力特、山本 雄太、二本 松太郎、長岡 利
    • 学会等名
      日本アミノ酸学会第13回学術大会(岩手)
  • [学会発表] A novel peptide derived from rice α-globulin decreased cholesterol micellar solubility in vitro and inhibited cholesterol absorption in rats.2019

    • 著者名/発表者名
      Maihemuti Mijiti, Wang Jilite, Huang Bingyu, Satoshi Nagaoka
    • 学会等名
      Asian Congress of Nutrition 2019 (Indonesia)
    • 国際学会
  • [学会発表] 茶カテキン(EGCG)による低密度 リポタンパク質受容体活性化に67kDaラミニン受容体は関与しない2019

    • 著者名/発表者名
      残華 久美子、川口 勇矢、岡田 雄大、長岡 利
    • 学会等名
      日本農芸化学会 2019年度大会(東京)
  • [学会発表] 機能性食品の安全性・機能性評価2019

    • 著者名/発表者名
      長岡 利
    • 学会等名
      第46回日本毒性学会学術年会シンポジ ウム(徳島)
    • 招待講演
  • [学会発表] 大豆タンパク質・ペプチドの栄養と機能2019

    • 著者名/発表者名
      長岡 利
    • 学会等名
      日本アミノ酸学会第8回夏のシン ポジウム(岐阜)
    • 招待講演
  • [学会発表] ペプチドが拓く健康科学の新しい世界―食品タンパク質由来の脂質代謝改善 ペプチドの発見―2019

    • 著者名/発表者名
      長岡 利
    • 学会等名
      名大・岐大農学シンポジウム ~TOKAI からSEKAI へ(岐阜)
    • 招待講演
  • [学会発表] コレステロールを低減する食品成分を探る~特定保健用食品(トクホ)の 研究開に従事して~2019

    • 著者名/発表者名
      長岡 利
    • 学会等名
      農林水産省東海農政局、名古屋大学大学院農学生命科学研究科、 愛知学院大学(主催)第2回官学シンポジウム(名古屋)
    • 招待講演
  • [学会発表] 生活習慣病を予防するコレステロール代謝改善ペプチドの発見2019

    • 著者名/発表者名
      長岡 利
    • 学会等名
      科学技術交流 財団 研究交流クラブ第196回定例会、基調講演(名古屋)
    • 招待講演
  • [産業財産権] 特許願2020

    • 発明者名
      長岡利、須藤慶太、桐山恵介
    • 権利者名
      長岡利、須藤慶太、桐山恵介
    • 産業財産権種類
      特許
    • 産業財産権番号
      特願2020-44636

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公開日: 2021-01-27  

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