| 研究課題/領域番号 |
17H01407
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
ゲノム生物学
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
伊藤 隆司 九州大学, 医学研究院, 教授 (90201326)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | 核内高次構造 / dCas9 / Dam / 生細胞可視化 / BiFC |
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| 研究成果の概要 |
核内高次構造を探る新しい方法として、標的ゲノム部位から空間的に一定の距離内に存在するゲノム領域を同定する方法および単一コピー遺伝子座の生細胞可視化法の開発に取り組んだ。前者については、dCas9のgRNAにMS2-MCP相互作用を介してテザリングしたDamメチレースによる周辺部位のメチル化に成功したが、空間近接部位のメチル化の確証は得られなかった。後者については、クロマチン上でシグナルノイズ比の高い生細胞イメージングを行うためのdCas9を介した二分子蛍光補完法の改良が進んだ。
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| 自由記述の分野 |
ゲノム科学
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
新しい核内高次構造解析技術の開発のための貴重な基盤情報が整備された。関連技術として開発された新規6mA解析法、BiFC可能な蛍光タンパク質の拡張、およびBiFCシグナル増強法は、本課題を越えて幅広い分野への波及効果が期待できるものである。また、本課題の過程で、従来、安全と考えられていたdCas9が、複製フォークの進行を停止し、局所的なゲノム不安定性を誘導することを見い出した。この知見は、dCas9の様々な応用において留意すべき点であり、特に社会的影響の大きな医療応用については重要な警鐘となる可能性がある。
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