| 研究課題/領域番号 |
17H01533
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
清水 重臣 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (70271020)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | GOMED |
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| 研究実績の概要 |
Golgi-mediated degradation pathway (GOMED)は、ゴルジ体から細胞外、細胞膜に運ばれる蛋白質輸送に障害が生じたときに、行き場を失った蛋白質が分解される機構である。GOMEDは、その異常により神経変性疾患を惹起することなどから、生理的に重要な細胞機能である。本研究では、①GOMED実行機構の解明、②GOMEDが重要な役割を担っている細胞の種類の同定、③GOMEDの動態解明、④GOMEDの変調から生じる細胞障害機序、の解明を目指している。これらの解析により、GOMEDの生体での役割ならびに、ゴルジ体の真の機能実態を明らかにする。
本年度は、「GOMED実行機構の解明」に関しては、これまで遺伝子欠損酵母株よりyGOMED1分子を同定していたが、さらに３種類の関連分子の同定に成功した。また、これらの分子を欠損した酵母細胞を作成し、いずれもGOMEDに関与していることを確認した。さらに、これら３種の分子には、哺乳動物ホモログ分子があり、これらの分子に関しても線維芽細胞にsiRNAを投与してノックダウンすることにより、GOMEDへの関与を確認することができた。
また、「GOMEDの生理機能」を明らかにするために、GOMED1 floxマウスとNestin-creマウス（神経特異的）、villin-creマウス（腸管特異的）、Rip-Creマウス(膵臓特異的）を交配して、それぞれの臓器でGOMED1を欠損したマウスを作成した。このうち、神経細胞で欠損させたマウスは、神経細胞の変性脱落、神経変性症状が見られた。即ち、神経細胞の機能維持にGOMEDが重要であることが判明した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
「GOMED実行機構の解明」並びに「GOMEDの生理機能解析」において、重要な知見が得られた。また、さらに追加の分子を同定できる系の構築にも成功した。「GOMEDの生理機能解析」に関しては、複数のcreマウスとの交配が必要であり、解析は次年度以降となる。「GOMEDの動態解明」に関しては、ゴルジ膜の動態解析系の構築や超解像顕微鏡を用いた解析が進行している。このように、研究の成果が得られるとともに、2年目以降の研究の準備作業も予定通り進捗した。
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| 今後の研究の推進方策 |
予定通り、「GOMED実行機構の解明」、「GOMEDが重要な役割を担っている細胞の種類の同定」、「GOMEDの動態解明」、「GOMEDの変調から生じる細胞障害機序」の解明を進める。特に、新規の関連分子の同定が成功しつつあり、当該分子の機能解析等も行う予定である。また、複数の像特異的ノックアウトマウスを行う予定である。さらに、ケミカルバイオロジーを用いたGOMED誘導化合物の探索も行う予定である。
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