新規・独自開発麻疹ウイルスベクターを用いた革新的遺伝子改変T細胞輸血療法の開発

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17H01547
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 谷 憲三朗 東京大学, 医科学研究所, 特任教授 (00183864)
• 研究分担者: 竹田 誠 国立感染症研究所, ウイルス第三部, 部長 (40311401)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 麻疹ウイルスベクター / T細胞 / プラスミド

研究実績の概要

本年度も引き続き新規遺伝子改変T細胞療法用低免疫原性麻疹ウイルスベクターとベクター産生細胞の開発研究を継続実施した。先ずパッケージング細胞の樹立と第二世代麻疹ウイルスベクター粒子産生系確立に関しては、2018年度までに得られた「宿主細胞の種類」および「H蛋白およびF蛋白供給量ならびにその適切な発現タイミング」を引き続き詳細に検討し、2種類のパッケージング細胞を樹立して、第二世代麻疹ウイルスベクターの産生法を確立することができた。確立した方法を用いることで、第二世代麻疹ウイルスベクターを安定的に産生(導入力価 > 1.0×10^6 IU/ml) する事が可能となった。さらに、健常人末梢血単核球よりCD3陽性T細胞を単離して、第二世代麻疹ウイルスベクターを用いてレポーター遺伝子を導入した結果、導入から2～3日後までに高い遺伝子導入効率(MOI=3で87.2%, MOI=5で89.0%)を得ることができた。次に、他のキメラ抗原受容体(CAR)やT細胞受容体(TCR)、光感受性Magnetタンパク、ならびにメチオニン分解酵素を挿入した機能性第二世代麻疹ウイルスベクターを作製するための基礎実験を実施した。これらの研究中に、今後様々な外来遺伝子を挿入する可能性が高いことから、外来遺伝子を容易に挿入可能な汎用性の高い麻疹ウイルスベクターを作製することの重要性を強く認識し、容易に外来遺伝子を入れ替え可能な多制限酵素認識遺伝子配列を有する第三世代H蛋白およびF蛋白欠失麻疹ウイルスベクターの作製を試みた。その結果、これまでに二種類の低免疫原性麻疹ウイルスベクタープラスミドの作製に成功した。現在は、各種遺伝子発現第三世代麻疹ウイルスベクター粒子を作製し、健常人由来CD3陽性T細胞に遺伝子導入し、遺伝子導入T細胞の特性解析(ウイルス抗原消失、導入遺伝子の発現期間等)を実施中である。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Successful Clinical Sequencing by Molecular Tumor Board in an Elderly Patient With Refractory Sezary Syndrome (2020)
  • 著者名/発表者名: Hijikata Yasuki、Yokoyama Kazuaki、Yokoyama Nozomi、Matsubara Yasuo、Shimizu Eigo、Nakashima Makoto、Yamagishi Makoto、Ota Yasunori、Lim Lay Ahyoung、Yamaguchi Rui、Ito Mika、Tanaka Yukihisa、Denda Tamami、Tani Kenzaburo、Yotsuyanagi Hiroshi、Imoto Seiya、Miyano Satoru、Uchimaru Kaoru、Tojo Arinobu
  • 雑誌名: JCO Precision Oncology 巻: 4 ページ: 534～560
  • DOI: 10.1200/PO.19.00254
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] A pilot study to establish human T‐cell leukemia virus type 1 (HTLV‐1) carrier model using common marmoset ( Callithrix jacchus ) (2020)
  • 著者名/発表者名: Hirose Lisa、Hiramoto Takafumi、Tian Yamin、Kohara Hiroshi、Kobayashi Seiichiro、Nagai Etsuko、Denda Tamami、Tanaka Yukihisa、Ota Yasunori、Jiyuan Liao、Miyamoto Shohei、Miura Yoshie、Hijikata Yasuki、Soda Yasushi、Inoue Takashi、Okahara Norio、Itoh Toshio、Sasaki Erika、Tojo Arinobu、Uchimaru Kaoru、Tani Kenzaburo
  • 雑誌名: Journal of Medical Primatology 巻: 49 ページ: 86～94
  • DOI: 10.1111/jmp.12454
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Safe Use of Nivolumab in a Patient with Epipharyngeal Carcinoma and Preexisting Ulcerative Colitis: A Histologically Proven Case Report (2020)
  • 著者名/発表者名: Hijikata Yasuki、Matsubara Yasuo、Ota Yasunori、Lim Lay Ahyoung、Tani Kenzaburo、Hirata Yoshihiro、Yotsuyanagi Hiroshi
  • 雑誌名: Internal Medicine 巻: 59 ページ: 1105～1109
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.3901-19
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Non-transmissible MV Vector with Segmented RNA Genome Establishes Different Types of iPSCs from Hematopoietic Cells (2020)
  • 著者名/発表者名: Hiramoto T、Tahara M、Liao J、Soda Y、Miura Y、Kurita R、Hamana H、Inoue K、Kohara H、Miyamoto S、Hijikata Y、Okano S、Yamaguchi Y、Oda Y、Ichiyanagi K、Toh H、Sasaki H、Kishi H、Ryo A、Muraguchi A、Takeda M、Tani K
  • 雑誌名: Molecular Therapy 巻: 28 ページ: 129～141
  • DOI: 10.1016/j.ymthe.2019.09.007
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Photocontrollable mononegaviruses (2019)
  • 著者名/発表者名: Tahara Maino、Takishima Yuto、Miyamoto Shohei、Nakatsu Yuichiro、Someya Kenji、Sato Moritoshi、Tani Kenzaburo、Takeda Makoto
  • 雑誌名: Proceedings of the National Academy of Sciences 巻: 116 ページ: 11587～11589
  • DOI: 10.1073/pnas.1906531116
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] KLF1 mutation E325K induces cell cycle arrest in erythroid cells differentiated from congenital dyserythropoietic anemia patient-specific induced pluripotent stem cells (2019)
  • 著者名/発表者名: Kohara H、Utsugisawa T、Sakamoto C、Hirose L、Ogawa Y、Ogura H、Sugawara A、Liao J、Aoki T、Iwasaki T、Asai T、Doisaki S、Okuno Y、Muramatsu H、Abe T、Kurita R、Miyamoto S、Sakuma T、Shiba M、Yamamoto T、Ohga S、Yoshida K、Ogawa S、Ito E、Kojima S、Kanno H、Tani K
  • 雑誌名: Experimental Hematology 巻: 73 ページ: 25～37.e8
  • DOI: 10.1016/j.exphem.2019.03.001
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Granulocyte colony-stimulating factor-associated aortitis in the Japanese Adverse Drug Event Report database (2019)
  • 著者名/発表者名: Oshima Yasuo、Takahashi Satoshi、Tani Kenzaburo、Tojo Arinobu
  • 雑誌名: Cytokine 巻: 119 ページ: 47～51
  • DOI: 10.1016/j.cyto.2019.02.013
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Extremely Low Organ Toxicity and Strong Antitumor Activity of miR-34-Regulated Oncolytic Coxsackievirus B3 (2019)
  • 著者名/発表者名: Jia Yang、Miyamoto Shohei、Soda Yasushi、Takishima Yuto、Sagara Miyako、Liao Jiyuan、Hirose Lisa、Hijikata Yasuki、Miura Yoshie、Hara Kenichiro、Iwanaga Atsufumi、Ota Yasunori、Tani Kenzaburo
  • 雑誌名: Molecular Therapy - Oncolytics 巻: 12 ページ: 246～258
  • DOI: 10.1016/j.omto.2019.01.003
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Novel Viral Oncolytic Therapies for Cancer (2019)
  • 著者名/発表者名: Tani K
  • 学会等名: The 4th TRANSMED-VN Conference
• [学会発表] Clinical translation of novel oncolytic Coxsickievirus B3 targeting solid tumors (2019)
  • 著者名/発表者名: Tani K
  • 学会等名: International Gene and Cell Therapy Symposium IGCT
• [学会発表] 5-ALAを用いた末梢血循環がん細胞の検出法確立にむけたパイロット研究 (2019)
  • 著者名/発表者名: 廣瀬理沙、小原洋志、相良京、三浦由恵、土方康基、曽田泰、宮本将平、廖紀元、高橋聡、篠崎大、大田泰徳、渡辺恵理、田中徹、中島元夫、木庭幸子、奥山隆平、福原秀雄、井上啓史、並川努、花﨑和弘、谷憲三朗
  • 学会等名: 第９回ポルフィリン-ALA学会
• [学会発表] Development of microRNA-regulated oncolytic Coxsackievirus for clinical trial (2019)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto S, Sagara M, Jia Y, Soda Y, Miura Y, Shimizu H, Tani K
  • 学会等名: 第25回日本遺伝子細胞治療学会学術集会
• [学会発表] Direct induction of naive-like human induced pluripotent stem cells (iPSCs) by a non-integrating measles virus vector (2019)
  • 著者名/発表者名: Liao J, Soda Y, Sugawara A, Miura Y, Hiramoto T, Tahara M, Takishima Y, Hijikata Y, Miyamoto S, Takeda M, Tani K
  • 学会等名: 第25回日本遺伝子細胞治療学会学術集会
• [学会発表] Measles virus vector is a promising tool for T-cell engineering and establishing naive-like iPSCs (2019)
  • 著者名/発表者名: Liao J, Soda Y, Sugawara A, Miura Y, Hiramoto T, Tahara M, Takishima Y, Miyamoto S, Hijikata Y, Takeda M, Tani K
  • 学会等名: 第81回日本血液学会学術集会
• [学会発表] 5-ALAを用いた末梢血循環がん細胞の検出法確立にむけたパイロット研究 (2019)
  • 著者名/発表者名: 廣瀬理沙、小原洋志、相良京、三浦由恵、石井有美子、土方康基、曽田泰、宮本将平、廖紀元、高橋聡、篠崎大、大田泰徳、渡辺恵理、田中徹、中島元夫、木庭幸子、奥山隆平、福原秀雄、井上啓史、並川努、花﨑和弘、谷憲三朗
  • 学会等名: 第６回PDDTフォーラム
• [学会発表] Dual microRNA Engineered Oncolytic Coxsackievirus Virotherapy for Clinical Trial (2019)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto S, Jia Y, Soda Y, Sagara M, Liao J, Hirose L, Hijikata Y, Hara K, Iwanaga A, Tani K
  • 学会等名: American Society of Gene and Cell Therapy 22nd Annual Meeting
• [産業財産権] 鎌状赤血球症の改善及び／又は予防剤 (2019)
  • 発明者名: 谷憲三朗、曽田泰、廖紀元、宮本将平、河田聡史、富岡基康、児玉健
  • 権利者名: 谷憲三朗、曽田泰、廖紀元、宮本将平、河田聡史、富岡基康、児玉健
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2019-170764