膵癌に対するiPS細胞由来樹状細胞による革新的ペプチドワクチン療法の臨床応用

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17H01580
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 山上 裕機 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (20191190)
• 研究分担者: 北畑 裕司 和歌山県立医科大学, 医学部, 学内助教 (00535338) ; 川井 学 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (40398459) ; 岡田 健一 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (50407988) ; 勝田 将裕 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (50464673) ; 尾島 敏康 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60448785) ; 廣野 誠子 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (60468288) ; 宮澤 基樹 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (90549734)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: iPS細胞 / 樹状細胞 / 癌ワクチン / ペプチド / 膵癌 / CTOS

研究実績の概要

2020年度は膵癌患者由来のiPS細胞より分化誘導した樹状細胞 (DC)を用いた研究を引き続き行った。膵癌患者15例を対象にまずは当科の4step法を用いてiPS細胞由来DCを分化し，その細胞の表面マーカーおよびサイトカイン分泌能(TNF-a, IL-12, IFN-g)を確認し，成熟能をチェックした。切除組織に目的とする抗原が発現しているかをflow cytometryで検討したところ，15例中12例にCEAおよび15例中10例にWT-１の発現が確認された。また全例にmesothelin, MUC-16, KIF20Aの発現を確認した。膵癌切除標本をもちいてCTOS法にて3D培養を行い，その後拡大培養を繰り返すことで15例中5例にcell line化が可能であった。またこの5例は切除標本同様にTAAを発現していることをFlow throughおよびCTOS両方から確認した。引き続きin vitroでのカクテルペプチドパルスiPS-DCのCTL誘導実験を行った。KIF20A, MUC16, Mesothelin, VEGFR1, R2をエピソーマル・プラスミド法で誘導したiPS-DCにパルスし、2日間培養。ペプチド刺激後のDCの表面マーカーCD80, CD83, CD86, MHC-classI，classIIおよびCCR7, TLR2,4の発現を確認した。ついで、カクテルペプチドで刺激したiPS由来DCと同一患者から採取した末梢血単核球を混合培養し、ペプチド特異的なCTLを誘導した。bulk CTLよりMACSにてCD8+細胞を抽出し、患者おのおののCTOS細胞をTargetとした51Cr release assayを行った。5例全例にCTOS細胞特異的な細胞傷害活性を認め、IFN-g release assayにてこのCTLはTAA特異的（mesothelin)なresponseを示した。現在KIF20A MUC1に対するresponseをIFN-g release assay ELISPOT LDH assayで確認している。

現在までの達成度 (段落)

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Oncolytic virotherapy with SOCS3 enhances viral replicative potency and oncolysis for gastric cancer. (2021)
  • 著者名/発表者名: Matsumura S, Nakamori M, Tsuji T, Kato T, Nakamura M, Ojima T, Fukuhara H, Ino Y, Todo T, Yamaue H.
  • 雑誌名: Oncotarget. 巻: 12 ページ: 344-354.
  • DOI: 10.18632/oncotarget.27873.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Preoperative detection of KRAS mutated circulating tumor DNA is an independent risk factor for recurrence in colorectal cancer. (2021)
  • 著者名/発表者名: Nakamura Y, Yokoyama S, Matsuda K, Tamura K, Mitani Y, Iwamoto H, Mizumoto Y, Murakami D, Kitahata Y, Yamaue H.
  • 雑誌名: Sci Rep. 巻: 11 ページ: 441.
  • DOI: 10.1038/s41598-020-79909-4.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Phase 1 Study of Combined Chemotherapy of Nab-Paclitaxel, S-1, and Oxaliplatin for Gastric Cancer with Peritoneal Metastasis (NSOX Study). (2021)
  • 著者名/発表者名: Nakamura M, Ojima T, Katsuda M, Hayata K, Kitadani J, Nakamori M, Yamaue H.
  • 雑誌名: Oncology. 巻: 99 ページ: 57-61.
  • DOI: 10.1159/000509396.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Surgical indication for intraductal papillary mucinous neoplasm without mural nodule 5 mm. (2021)
  • 著者名/発表者名: Tsumura A, Hirono S, Kawai M, Okada KI, Miyazawa M, Kitahata Y, Kobayashi R, Hayami S, Ueno M, Yanagisawa A, Yamaue H.
  • 雑誌名: Surgery. 巻: 169 ページ: 388-395.
  • DOI: 10.1016/j.surg.2020.07.005.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Radiographic Splenic Artery Involvement Is a Poor Prognostic Factor in Upfront Surgery for Patients with Resectable Pancreatic Body and Tail Cancer. (2021)
  • 著者名/発表者名: Kawai M, Hirono S, Okada KI, Miyazawa M, Kitahata Y, Kobayashi R, Ueno M, Hayami S, Yamaue H.
  • 雑誌名: Ann Surg Oncol. 巻: 28 ページ: 1521-1532.
  • DOI: 10.1245/s10434-020-08922-8.
  • 査読あり
• [雑誌論文] History of pancreatic surgery in Japan: Respect to the Japanese pioneers of pancreatic surgery. (2020)
  • 著者名/発表者名: Yamaue H.
  • 雑誌名: Ann Gastroenterol Surg. 巻: 4 ページ: 118-125.
  • DOI: 10.1002/ags3.12320.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Predictive and sensitive biomarkers for thyroid dysfunctions during treatment with immune-checkpoint inhibitors. (2020)
  • 著者名/発表者名: Kurimoto C, Inaba H, Ariyasu H, Iwakura H, Ueda Y, Uraki S, Takeshima K, Furukawa Y, Morita S, Yamamoto Y, Yamashita S, Katsuda M, Hayata A, Akamatsu H, Jinnin M, Hara I, Yamaue H, Akamizu T.
  • 雑誌名: Cancer Sci. 巻: 1111 ページ: 1468-1477.
  • DOI: 10.1111/cas.14363.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Anticancer effects of chemokine-directed antigen delivery to a cross-presenting dendritic cell subset with immune checkpoint blockade. (2020)
  • 著者名/発表者名: Mizumoto Y, Hemmi H, Katsuda M, Miyazawa M, Kitahata Y, Miyamoto A, Nakamori M, Ojima T, Matsuda K, Nakamura M, Hayata K, Fukuda-Ohta Y, Sugiyama M, Ohta T, Orimo T, Okura S, Sasaki I, Tamada K, Yamaue H, Kaisho T.
  • 雑誌名: Br J Cancer. 巻: 122 ページ: 1185-1193.
  • DOI: 10.1038/s41416-020-0757-2.
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] iPS細胞由来樹状細胞を用いた癌ワクチン療法 (2021)
  • 著者名/発表者名: 尾島 敏康 岩本 博光 北谷 純也 丸岡 慎平 冨永信太 山上 裕機
  • 学会等名: 第20回日本再生医療学会総会
  • 招待講演