研究課題/領域番号 |
17H01602
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研究機関 | 千葉大学 |
研究代表者 |
丹沢 秀樹 千葉大学, 大学院医学研究院, 教授 (50236775)
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研究分担者 |
皆川 康之 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任助教 (30639787)
坂本 洋右 千葉大学, 医学部附属病院, 講師 (50451745)
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研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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キーワード | 口腔扁平上皮癌 / ALY / GAD1 / HTR2C / KLK13 / βcatenin / Wnt / Cadherin |
研究実績の概要 |
先行研究において細胞接着を制御する主要な因子は、それぞれにカスケードを構成し、さらに網の目のようなネットワークを構成することを明らかにした。また、このネットワークを構成する以下5種類のカスケード(HTR2C-Lin7C-CASK-βcatenin-cadherin カスケード、GAD1のβcatenin リン酸化阻害によるWnt 経路制御カスケード、Aly→RRP18-CD82カスケード、KLK13→Desmosome構成成分産生カスケード、KLK13→Cadherin構成成分産生カスケード)に関し、個々のカスケードによる細胞接着の抑制が癌転移と強く相関していることを報告した。本研究は、口腔扁平上皮癌、腺癌、悪性黒色腫などの細胞株を用いて、このネットワークおよび各カスケード間の相互作用を明らかにし、転移抑制薬剤の開発を行うことを目標とする。 本年度は、前年度から継続し、口腔扁平上皮癌、腺癌、悪性黒色腫の細胞株を用いて、各カスケードの制御遺伝子 (HTR2C, GAD1, Aly, KLK13)の形質転換細胞株を樹立し、機能解析を行ったところ、細胞浸潤能および遊走能の低下を認めた。さらに、各形質転換細胞株においてβcatenin関連遺伝子カスケードを構成する遺伝子群、並びに細胞接着機構関連遺伝子群の発現を確認し、それぞれのカスケード制御におけるβcateninの核内移動量変化について解析した。さらに、癌細胞移植マウスを使用したin vivoでの実験を口腔扁平上皮癌、腺癌、悪性黒色腫における各制御遺伝子の形質転換細胞株を用いて行った。細胞移植マウスより摘出した各種臓器からgDNAを抽出し、qRT-PCR法で解析した。結果、候補遺伝子発現形質転換細胞株を移植したマウスでは転移個体数が著明に減少していた。以上の結果は癌転移治療に大きな意義を持つと考えられる。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
口腔扁平上皮癌、腺癌、悪性黒色腫の細胞株を用いて、各カスケードの制御遺伝子 (HTR2C, GAD1, Aly, KLK13)の形質転換細胞株を樹立し、機能解析を行っている。また、癌細胞移植マウスを使用したin vivoでの実験を口腔扁平上皮癌、腺癌、悪性黒色腫における各制御遺伝子の形質転換細胞株を用いて行っている。以上のことより、本年度予定していた研究計画については、順調に進展している。
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今後の研究の推進方策 |
転移抑制候補薬剤を用いて機能解析と細胞接着機構、各カスケードへの影響、相互作用などを詳細に検討していく予定である。in vitroで確認後、マウスにおける転移抑制候補薬剤を用いた転移実験を予定し、強力に癌転移を抑制する薬剤を絞り込む。
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