| 研究課題/領域番号 |
17H01914
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| 研究機関 | 熊本県立大学 |
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研究代表者 |
有薗 幸司 熊本県立大学, 環境共生学部, 教授 (70128148)
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| 研究分担者 |
冨永 伸明 有明工業高等専門学校, 創造工学科, 教授 (30227631)
石橋 弘志 愛媛大学, 農学研究科, 准教授 (90403857)
吉田 佳督 修文大学, 看護学部, 教授 (90506635)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | エクインエストロゲン / ゼブラフィッシュ / 次世代シーケンス / 発生毒性 / パスウェイ解析 |
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| 研究実績の概要 |
昨年度まで、エクイリン（Eq）を曝露したヒメダカの産卵数の減少や次世代胚の孵化率の低下、高電界パルス印加したEqおよびエクイレニン（Eqn）のヒメダカ発生毒性と胚トランスクリプトームに及ぼす影響を明らかにした。本年度は、ゼブラフィッシュ胚を用いて17β-エストラジオール（E2）、EqおよびEqnのトランスクリプトームに及ぼす影響をRNA-seq解析により評価した。各物質のCYP19A1b発現誘導に関するEC20およびEC80をそれぞれ低濃度曝露群、高濃度曝露群とし、受精後72時間の胚に水性曝露を行い受精後96時間で採材した。得られた結果より、マッピングされたリード数がコントロールと曝露群を合計して10未満のものを除き、発現量が3倍以上、1/3以下に変動した遺伝子をDEGsとした。各物質の高濃度曝露群では、DEGsはE2で最も少なく、902遺伝子、次いで、Eqnの1440遺伝子、最も多いEqで1643遺伝子であった。すべての物質で共通したDEGsは129遺伝子であった。E2、Eq、Eqnの高濃度曝露群でのDEGsについて機能アノテーション情報のエンリッチメント解析を行った結果、p-valueが低い20 の用語ではE2、Eq、Eqnで共通のものは得られなかった。EQsでは共通して、reactomeパスウェイデータベースで「インスリン様成長因子結合タンパク質（IGFBP）によるIGFの輸送と取り込みの制御」とアノテーションされている遺伝子、およびGOデータベースの酸化還元に関わる遺伝子がDEGsに含まれていた。Eqでは血液凝固に関わる遺伝子や、心臓の形態形成に関わる遺伝子がDEGsに含まれていた。さらに、EqとEqnに共通して、高濃度曝露群では複数の異物代謝酵素の発現量増加（複数のCYP2AA分子種やCYP3C3、CYP2Y3等）が認められた。以上のことから、EqやEqnは、少なくとも一部はE2と異なる作用機序を有し、トランスクリプトーム発現に影響を及ぼしていると考えられた。
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| 現在までの達成度 (段落) |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和元年度が最終年度であるため、記入しない。
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