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2019 年度 実績報告書

超高感度血漿分析技術とin silico 探索法による新規ペプチドホルモンの探索

研究課題

研究課題/領域番号 17H02206
研究機関北里大学

研究代表者

小寺 義男  北里大学, 理学部, 教授 (60265733)

研究分担者 七里 眞義  北里大学, 医学部, 教授 (10206097)
研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2020-03-31
キーワード生理活性ペプチド / ペプチド―ム / 血漿 / native peptide
研究実績の概要

独自の方法を用いて探索した血漿中の約18000種類のペプチド(血漿ペプチドライブラリ)の中の約300種類のペプチドについて、各種活性を検討した結果、6種類の生理活性を持つ可能性の高いペプチドを見出した。この中の3種類は1つのタンパク質に由来するものであり、その中の1つは腹腔内投与により食欲を減退させる作用を持ち、残りの2つは、有糸分裂誘発、アポトーシスの抑制、炎症性サイトカインの発現を誘発するものであった。また、残り3つについては安定同位体標識ペプチドをスパイクした血漿からペプチドを抽出し、質量分析計で分析して血中濃度の測定を行い、詳細な活性研究を進めている。
ペプチド分析技術の高感度化に関しては、血漿から抽出したペプチドを分画する方法を検討した。その結果、高pH 下での逆相分離と当グループで2014年に開発したcyclic pooling法を組み合わせることによってより効率的で分離能の高いLC-MS分析に適した分画法の確立に成功した。
グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド(GIP)に蛍光標識してnative PAGEで分離し、ゲル上で蛍光標識GIPが存在している部分を切り出してGIPに結合する血漿タンパク質をLC-MS/MS法で解析した。その結果、アルブミン, IgG、トランスフェリンの3種類の蛋白質がGIPに結合している可能性を示した。さらに、このことを3種類のタンパク質単体とGIPを混合した試料に対するウエスターンブロッティングで解析し、それぞれがGIPと複合体を組むことを示した。

現在までの達成度 (段落)

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (11件)

すべて 2020 2019

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 5件、 オープンアクセス 4件) 学会発表 (6件)

  • [雑誌論文] PACT/PRKRA and p53 regulate transcriptional activity of DMRT12020

    • 著者名/発表者名
      Fujitani K, Otomo A, Nagayama Y, Tachibana T, Kato R, Kawashima Y, Kodera Y, Kato T, Takada S, Tamura K, Takamatsu N, Ito M
    • 雑誌名

      Genet Mol Biol.

      巻: 43 ページ: e20190017

    • DOI

      10.1590/1678-4685-GMB-2019-0017

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Oxidised Met147 of human serum albumin is a biomarker of oxidative stress, reflecting glycaemic fluctuations and hypoglycaemia in diabetes2020

    • 著者名/発表者名
      Momozono Akari、Kodera Yoshio、Sasaki Sayaka、Nakagawa Yuzuru、Konno Ryo、Shichiri Masayoshi
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 10 ページ: 268

    • DOI

      10.1038/s41598-019-57095-2

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] S100A4/non-muscle myosin II signaling regulates epithelial-mesenchymal transition and stemness in uterine carcinosarcoma2019

    • 著者名/発表者名
      Tochimoto Masataka、Oguri Yasuko、Hashimura Miki、Konno Ryo、Matsumoto Toshihide、Yokoi Ako、Kodera Yoshio、Saegusa Makoto
    • 雑誌名

      Laboratory Investigation

      巻: 100 ページ: 682-695

    • DOI

      10.1038/s41374-019-0359-x

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Molecular form and concentration of serum α2-macroglobulin in diabetes2019

    • 著者名/発表者名
      Yoshino Sonomi、Fujimoto Kazumi、Takada Tesshu、Kawamura Sayuki、Ogawa Junro、Kamata Yuji、Kodera Yoshio、Shichiri Masayoshi
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 9 ページ: 12927

    • DOI

      10.1038/s41598-019-49144-7

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Identification of plasma binding proteins for glucose-dependent insulinotropic polypeptide2019

    • 著者名/発表者名
      Hoshiyama Ayako、Fujimoto Kazumi、Konno Ryo、Sasaki Sayaka、Momozono Akari、Kodera Yoshio、Shichiri Masayoshi
    • 雑誌名

      Endocrine Journal

      巻: 66 ページ: 621~628

    • DOI

      10.1507/endocrj.EJ18-0472

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 水中拘束ストレスマウスの大脳皮質を対象とした包括的なタンパク質存在様式の比較分析2019

    • 著者名/発表者名
      紺野 亮, 伊藤 大晃, 樋口 雅崇, 松井 崇, 佐藤 俊哉, 板倉 誠, 小寺 義男
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2019年大会・第70回日本電気泳動学会総会 合同大会(2019.7.24-7.26)
  • [学会発表] 安定同位体標識法とGeLC-MS/MS法を組み合わせたタンパク質存在様式の比較分析法の確立と応用2019

    • 著者名/発表者名
      伊藤 大晃, 紺野 亮, 福井 朋也, 松井 崇, 長塩 亮, 佐藤 雄一, 小寺 義男
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2019年大会・第70回日本電気泳動学会総会 合同大会(2019.7.24-7.26)
  • [学会発表] マウスの小腸・大腸を対象としたペプチドーム解析の基礎的検討2019

    • 著者名/発表者名
      中川 譲, 山田 拓也, 佐藤 雅, 松井 崇, 板倉 誠, 岩渕 和也, 小寺 義男
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2019年大会・第70回日本電気泳動学会総会 合同大会(2019.7.24-7.26)
  • [学会発表] 肺腺癌における上皮-間葉移行を標的とした血清診断マーカーの獲得2019

    • 著者名/発表者名
      土屋 紅緒, 柳田 憲吾, 紺野 亮, 小寺 義男, 佐藤 雄一
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2019年大会・第70回日本電気泳動学会総会 合同大会(2019.7.24-7.26)
  • [学会発表] 脳の機能状態モニタリングを目指した脳脊髄液の詳細な比較分析への取り組み2019

    • 著者名/発表者名
      角田 貴樹, 紺野 亮, 板倉 誠, 松井 崇, 小寺 義男
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2019年大会・第70回日本電気泳動学会総会 合同大会(2019.7.24-7.26)
  • [学会発表] 血漿ペプチドミクスによる新規生理活性ペプチドの探索2019

    • 著者名/発表者名
      小寺 義男, 藤本 和美, 中川 譲, 斎藤 達也, 川島 祐介, 七里 眞義
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2019年大会・第70回日本電気泳動学会総会 合同大会(2019.7.24-7.26)

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公開日: 2021-01-27  

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