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今年度は、昨年度に酵母ツーハイブリッド法により同定していた、哺乳動物Maxの線虫ホモログsvh-14に結合する因子Yについて、さらなる解析を行なった。因子Yは、Ets結合タンパク質TDP2の線虫ホモログTDPT-1であった。さらに、昨年度にCRISPR/Cas9法により作成した、tdpt-1欠損変異体について、軸索再生への関与を調べたところ、再生率は野生型と同程度か、やや高めの値を示した。そこで、tdpt-1が軸索再生を負に調節する因子ではないかと考え、mxl-1との二重変異体を作成したところ、mxl-1欠損変異による軸索再生率の低下がtdpt-1の欠損により抑圧された。よって、MXL-1はTDPT-1を負に制御することにより、神経軸索再生を促進することが示唆された。TDPT-1がTDP2のホモログであることから、TDPT-1もTDP2と同様にEts型転写因子に結合する可能性が考えられた。これまでの研究から、線虫の軸索再生に関わるEts型転写因子としてETS-4が同定されている。そこでまず、哺乳動物培養細胞を用いて、TDPT-1とETS-4の結合を生化学的に検討したところ、両者が結合することが判明した。さらに、哺乳動物のTDP2はSUMOおよびSUMOリガーゼと結合することが知られていることから、TDPT-1がETS-4をSUMO化するか可能性を考え、生化学的に検討したところ、哺乳動物細胞で発現させたETS-4はTDPT-1と共発現させるとSUMO化されることを見出した。以上のことから、軸索再生においてSVH-14はTDPT-1を抑制すること、またTDPT-1はETS-4のSUMO化を誘導することが明らかになった。
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